La Diagnosi di Laboratorio delle Malattie da Protozoi - tutte mappe

6) Saggio Immunoenzimatico (ELISA)
(Saggio di immunoassorbimento con enzima coniugato (ELISA,”Enzyme-Linked
Immunosorbent Assay”).
Questo test viene impiegato in Protozoologia per la ricerca diretta dell’antigene specifico
di Entamoeba, Giardia e Cryptosporidium dal campione di copros.
I pozzetti di reazione, sensibilizzati con anticorpi specifici, si cimentano col campione
biologico, opportunamente trattato e si incuba per alcune ore (2-6 h) a 37° C.
Se nel campione testato, sono presenti antigeni, questi si legheranno ai pozzetti sensibilizzati.
L’aggiunta dell’anticorpo specifico coniugato con un enzima (fosfatasi alcalina, perossidasi)
e la successiva aggiunta, dopo i necessari lavaggi, del substrato colorimetrico
specifico per l’enzima, darà origine, nel caso di responso positivo, ad una modificazione
dello spettro di assorbimento del substrato con la possibilità di registrare l’assorbimento
a una data lunghezza d’onda.
La caratteristica dell’ELISA è la sua versatilità, cioè la sua abilità nel determinare
antigeni di diverse morfologie e dimensioni.
Gli svantaggi principali dei test ELISA sono l’impossibilità di osservare la reazione
direttamente come nell’IFD e/o IFI.
Reagenti per test in ELISA
33