La Diagnosi di Laboratorio delle Malattie da Protozoi - tutte mappe

Metodi diretti
1. Colorazione Ziehl-Neelsen mod.
2. Immunofluorescenza
1.Colorazione Ziehl-Neelsen mod.
• La colorazione si fonda sul principio della acido-alcool resistenza
• Si preparano strisci del campione di espettorato o BAL su vetrino portaoggetto.
• Il preparato viene lasciato asciugare per 24 h.
• Fissazione in metanolo per 10’.
• Deporre sul preparato la carbolfucsina per 15’-20’.
• Lavare con acqua di fonte, quindi asciugare su carta assorbente.
• Aggiungere il decolorante (soluzione di acido acetico in alcool etilico) per 15”-30”.
• Lavare con acqua di fonte e lasciar asciugare.
• Deporre il colorante di contrasto (sol. di verde malachite) per 2’-5’.
• Lavare con acqua di fonte e lasciar asciugare
Si osserva al microscopio ottico a 200-400x e si evidenzieranno, se presenti, le oocisti
colorate in rosso più o meno intenso ed il fondo risulta verde
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Oocisti di Cryptosporidium spp. 400x (Col. Ziehl-Neelsen mod.)