La Diagnosi di Laboratorio delle Malattie da Protozoi - tutte mappe

4. Test Immunocromatografico (ICT)
I saggi rapidi immunocromatografici sono usati come supporto addizionale agli esami
microscopici nella diagnosi dell’infezione da Cryptosporidium.
Il principio del test si fonda sulla messa in evidenza degli antigeni specifici di
Cryptosporidium, presenti nel copros dei soggetti infetti, con anticorpi specifici.
Per l’esecuzione del test si esegue la tecnica di raccolta dei campioni di copros abitualmente
impiegate per l’esame parassitologico tradizionale come descritto nella
“Raccolta campione”.
• I campioni di copros freschi devono essere diluiti in rapporto 1/4 ( per es. 0.1ml
di campione di copros in fisiologica e 0.3 ml di acqua distillata).
• I campioni in formalina o SAF vengono utilizzati senza ulteriori diluizioni.
L’immunodosaggio di tipo cromatografico rileva la presenza degli antigeni di
Cryptosporidium utilizzando la trasmissione per capillarità del campione attraverso
una membrana impregnata con anti- Cryptosporidium di coniglio.
Esecuzione:
• In una provetta mettere 4 gocce di soluzione tampone e 0.1ml di campione,
miscelare.
• Aggiungere 4 gocce di coniugato costituito di anticorpi monoclonali specifici di
topo per Cryptosporidium, miscelare.
• Nel dispositivo per il test vengono poste 0.2ml di miscela campione/coniugato
La miscela si trasmette per capillarità lungo una membrana contenente una striscia
per la cattura dell’anticorpo. Se presenti, i complessi immunologici di
Cryptosporidium reagiscono con l’anticorpo anti- Cryptosporidium nella linea del test
e una linea rossa di qualunque intensità apparirà nella posizione di test
Cryptosporidium. Invece, se assenti gli antigeni specifici nel campione esaminato, le
microparticelle marcate con l’anticorpo non legate all’antigene vengono catturate
successivamente nella linea di controllo contenente anticorpo anti-topo.
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