La Diagnosi di Laboratorio delle Malattie da Protozoi - tutte mappe

Ricerca di Leishmania
Biopsato duodenale e/o aspirato duodenale
Nel paziente HIV + la localizzazione delle leishmanie è, atipicamente, nel tratto
gastroenterico. In questi pazienti, la cui sierologia specifica, spesso, è negativa o, al
massimo, positiva a bassi titoli, la diagnosi di leishmaniosi si fonda, quindi, sulla
ricerca delle Leishmanie nell’adatto campione biologico.
Il materiale di elezione è l’aspirato duodenale o il biopsato duodenale.
L’aspirato duodenale, giunto, rapidamente, in laboratorio viene centrifugato a basso
numero di giri, 2000 giri, per 10’.
Il sedimento ottenuto, viene risospeso in un piccolo volume di acqua distillata sterile,
• 20µl di questa sospensione vengono posti su ciascun vetrino per le colorazioni,
• 5-7 gocce vengono insemenzate nel terreno per la coltura.
Se, invece, il biopsato duodenale, è di consistenza, solida, si preparano delle:
• “impressioni” su vetrino per le colorazioni e,
• si stempera il pezzo di tessuto in una provetta sterile con fisiologia in modo da
frammentare quanto più possibile il campione in pezzi più piccoli e 5-7 gocce di
questo preparato vanno insemenzati nel terreno di coltura.
La diagnosi di laboratorio si fonda:
Metodi diretti
1. Colorazione May-Grunwald Giemsa (MGG)
2. Coltura
1. Colorazione è di MayGrunwal-Giemsa, la stessa utilizzata per gli altri tessuti.
Il vetrino, colorato, viene osservato al microscopio ottico con obiettivo 100x
Se positivo, si evidenzieranno gli amastigoti di Leishmania, intra ed extracellulari,
come corpiccioli rotondeggianti od ovoidali della grandezza di 1.5-4µ con nucleo
eccentrico, cinetoplasto bastoncellare affianco al nucleo, entrambi colorati in rosso
violaceo e con citoplasma colorato in azzurro.
Amastigoti di Leishmania: Aspirato duodenale
400x (Col. MGG)
Amastigoti di Leishmania: Aspirato duodenale
1000x (Col. MGG)
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