La Diagnosi di Laboratorio delle Malattie da Protozoi - tutte mappe

2. Calcofluor ( Fluorescent brightener)
• Deporre su vetrino, con pozzetto, 20µl di sedimento di copros
• Fissare in metanolo per 10’
• Colorare con Calcofluor (CFW 0,001% in PBS Ph 7.2) per 30’
• Lavare con acqua distillata
• Disidratare.
Montare con glicerina tamponata ed osservare al microscopio a fluorescenza, con filtro
da 340-380 nanometri, con obiettivo 100x.
Le spore appariranno azzurro-verdi su fondo nero.
3. Giemsa
Spore di Microsporidi (Col. calcofluor) 1000x
La colorazione di Giemsa non è adatta per il campione di copros in quanto diventa
difficile, date le dimensioni delle spore e la quantità di batteri solitamente presenti nel
campione, riuscire ad identificare le spore dei microsporidi.
È utile, invece, sui campioni biologici di altri distretti, come scraping corneale, liquor,
biopsati ecc., che essendo materiale in genere privo di batteri rende possibile il riscontro
delle spore di microsporidio.
Il sedimento del campione biologico viene strisciato su vetrino.
Fissare in metanolo per 3-5’.
Colorare, con Giemsa diluito 1/10, per 30’.
Lavare ed osservare al microscopio ottico con obiettivo 100x.
Le spore appariranno blu scuro-violetto.
Spore di Microsporidi (Col. Giemsa) 1000x
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