La Diagnosi di Laboratorio delle Malattie da Protozoi - tutte mappe

2. Colorazione di Gram-Weigert
La colorazione non prevede nessun trattamento preliminare:
• Fissare i vetrini in alcool-etere per 20’
• Colorare i vetrini con Emallume di Mayer per 3’-5’
• Lavare in acqua di rubinetto fino al viraggio al blue-violetto
• Colorare con Eosina 1% per 5’
• Lavare in acqua di rubinetto
• Colorare con Violetto di Genziana per 2’
• Lavare rapidamente con acqua di rubinetto
• Mordenzare con Lugol per 1’
• Lavare rapidamente con acqua di rubinetto
• Asciugare i vetrini su carta da filtro; attendere che siano ben asciutti.
• Differenziare e disidratare con miscela 1:1 di olio di anilina e xilene;
ricoprire e svuotare i vetrini fino all’eliminazione completa del violetto (circa2’)
• Immergere i vetrini in xilene per 5’ quindi montarli con Entellan
• Osservare al microscopio ottico a 400 e1000x.
La colorazione di Gram-Weigert, abbastanza complessa e lunga, ha, però, il vantaggio
di rendere visibili la parete, il contenuto cistico ed i trofozoiti.
Trofozoiti e cisti di Pneumicystis jiroveci 400x
(Col. di Gram-Weigert)
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Cisti di Pneumicystis jiroveci 1000x
(Col. di Gram-Weigert)