NOM-010-STPS-1999 - Normas Oficiales Mexicanas de Seguridad y ...

émbolo se jala hacia atrás 0.2 μl para separar el solvente de lavado de la muestra con una bolsa de aire
para ser usada como marcador. La aguja entonces se sumerge en la muestra y se toma una alícuota de 5
μl, tomando en consideración el volumen de la aguja, ya que la muestra en la aguja se inyecta
completamente. Después de que la aguja se remueve de la muestra, y antes de la inyección, el émbolo
se jala 1.2 μl para minimizar la evaporación de la muestra de la punta de la aguja. Observe que la
muestra ocupe de 4.9 a 5 μl en el barril de la jeringa. Duplicar las inyecciones de cada muestra y
patrones. No se debe esperar una diferencia de más de 3% en área.
Se puede usar un inyector de muestra automático si se demuestra que la reproducibilidad que da es al
menos tan buena como la de la técnica de inyección.
9.4.5 Medición de área.
El área de pico de muestra es medida por un integrador electrónico o alguna otra forma apropiada de
medición de área y los resultados preliminares son leídos de una curva patrón preparada como se indica
adelante (véase 10).
9.5 Determinación de la eficiencia de desadsorción.
9.5.1 Importancia de la determinación.
La eficiencia de desadsorción de un compuesto en particular puede variar de un laboratorio a otro, y
además de un lote de sílica-gel a otro. Por ello es necesario determinar, cuando menos una vez, el
porcentaje del compuesto específico que es removido en el proceso de desadsorción.
9.5.2 Procedimiento para determinar la eficiencia de desadsorción.
La sílica-gel equivalente a la cantidad en la primera sección del tubo de muestreo (100 mg), es
medida en un recipiente de muestra de 2 ml. Esta sílica-gel debe ser la misma que la usada al obtener las
muestras y se puede obtener de tubos de sílica–gel no usados.
Inyectar directamente en la sílica–gel una cantidad conocida de la sustancia analizada con una
microjeringa de 10 μl y el recipiente es tapado. La cantidad inyectada es equivalente a la cantidad
presente en una muestra de 5 l al nivel seleccionado.
Cuando menos seis tubos en cada uno de los tres niveles (0.5, 1 y 2 veces la concentración
establecida en el LMPE), son preparados en esta manera y se dejan en posición vertical al menos por una
noche para asegurar la adsorción completa del contenido de la sílica-gel. Estos tubos son comparados con
las muestras.
Un tubo de referencia debe ser tratado en paralelo de la misma manera, excepto que no se le añade
ninguna muestra. Los tubos de muestra y el tubo de referencia son desadsorbidos y analizados de la
manera descrita en 9.4. La masa de la sustancia a analizar encontrada en cada tubo se determina a
partir de la curva patrón (véase 11). La eficiencia de desadsorción se determina por la ecuación siguiente:
masa promedio recuperada en miligramos
ED . .=
masa añadida en miligramos
La eficiencia de desadsorción depende de la cantidad de la sustancia a analizar colectada en la sílicagel.
Graficar la eficiencia de desadsorción contra la masa de la sustancia a analizar encontrada. Esta
curva se usa en 11.4 para corregir pérdidas de adsorción.
10. Calibración y patrones
Es conveniente expresar la concentración de los patrones en términos de mg/ml, del eluyente. Una
serie de patrones, variando en concentraciones de cromatografía de gases y durante el mismo periodo de
tiempo que las muestras desconocidas. Las curvas son establecidas graficando las concentraciones en
mg/ml contra el área del pico.
NOTA: Las soluciones patrón se deben analizar el mismo tiempo que se realiza el análisis.
Esto minimizará el efecto de las variaciones de la respuesta DIF.
11. Cálculos
11.1 Leer la masa, en mg, correspondiente a cada área de pico (razón de área en el caso del método
de patrón interno) de la curva patrón. No se necesitan correcciones de volumen porque la curva está en