Methoden zur Evaluation von Zytotoxizit¨at und Struktur ... - OPUS

114 4. Ergebnisse und Diskussion
4.2.11.2 Präzision
Bei der Methodenentwicklung am Stamm M. luteus zeigte sich, dass die Durchführung
von Wiederholmessungen mikrobieller Proben aus einem Inkubationszeitfenster von
ca. 12 h am gleichen Tag die beste Reproduzierbarkeit lieferte (Abschnitt 4.2.7.4). Zur
Bestimmung der Präzision, dem quantitativen Maß für die Robustheit einer Methode,
welche als Standardabweichung s berechnet wird [153], wurden deshalb in Abbildung
4.39 sechs Pseudomonas-Proben nach einer Inkubationszeit von 24 h bis 36 h in kurzen
Zeitabständen unter gleichen CE-Bedingungen analysiert. Die Probenkonzentrationen
zeigten jeweils einen OD600-Wert von 0.5. Die Integration der Elektropherogramme er-
gab eine korrigierte Gesamtfläche von: 330290.46 ± 41010.17 normiert auf einen OD600-
Wert von 1. Dies entspricht einer Standardabweichung von 12.42% und liegt damit
im Bereich biometrischer Größen [216]. Eine große Fehlerquelle in der CE-Methode
stellt die Injektion dar, die aufgrund der geringen Anzahl der Partikel pro Volumen
zu statistischen Imperfektionen führt, die sich neben den in Abschnitt 4.2.7.4 beschrie-
benen qualitativen Änderungen des Peakmusters auch in quantitativen Schwankun-
gen äußern kann. Bezüglich der Schwankungen in den Migrationszeiten wurde für
den Einzelzellen-repräsentierenden-ersten-Peak eine Migrationszeit von 7.04 ± 0.23
Minuten gemessen. Dies entspricht einer Standardabweichung von 3.29 %, womit die
Schwankung durchaus noch im Rahmen der üblichen Arzneistoff-Analytik lag [153].
Abbildung 4.39: Analyse von P.
fluorescens-Proben nach einer Inkubationszeit
zwischen 24 h bis
30 h, am gleichen Tag gemessen.
Für Trennpuffer, CE- und Probenbedingungen,
siehe Abbildung
4.33.