Methoden zur Evaluation von Zytotoxizit¨at und Struktur ... - OPUS

50 3. Theoretische Grundlagen
ε : Dielektrizitätskonstante
ζ : ζ-Potenzial
η : dynamische Viskosität
und kann experimentell aus der Migrationszeit eines Neutralmarkers bestimmt wer-
den.
3.4.4 Kapillarelektrophoretische Methoden
Die Vielseitigkeit der CE leitet sich vor allem von ihren zahlreichen Methoden ab,
deren Trennmechanismen auf unterschiedlichen physikalischen Grundsätzen beruhen
und dadurch die Gewinnung orthogonaler und komplementärer Informationen mög-
lich wird. Die bedeutendsten Methoden sind die Kapillarzonenelektrophorese (CZE),
die mizellare elektrokinetische Chromatographie (MEKC), die Kapillargelelektropho-
rese (CGE), die Kapillarelektrochromatographie (CEC), die Kapillar-Isoelektrische Fo-
kussierung (CIEF) und die Kapillarisotachophorese (CITP). Für diese Arbeit spielen
lediglich die Kapillarzonenelektrophorese und die Kapillargelektrophorese eine Rolle,
so dass nur für diese beiden Methoden eine nähere Ausführung folgt:
3.4.4.1 Kapillarzonenelektrophorese (CZE)
Die CZE wird ausschließlich mit Trennpuffer gefüllten Kapillaren durchgeführt und
gilt als das am häufigsten angewandte Verfahren. Die Trennung beruht ausschließlich
auf Mobilitätsdifferenzen aufgrund unterschiedlicher Ladung und Reibungskoeffizi-
enten [87].
3.4.4.2 Kapillargelelektrophorese (CGE)
Die CGE wird hauptsächlich zur Analyse von Makromolekülen wie DNA/RNA und
Biokolloiden angewandt, welche häufig über ähnliche oder gar gleiche Oberfläche-zu-
Ladungsverhältnisse verfügen. Die Trennung dieser effektiv gleich geladenen Analy-
ten erfolgt in mit Polymerlösung oder Gel (Trennmatrix) gefüllten Kapillaren aufgrund
ihrer unterschiedlichen Molekül- bzw. Partikelgröße. Die Gelmatrix besteht hauptsäch-
lich aus Acrylamid, Agarose und Cellulose. Ihr eingesetzter Konzentrationsbereich
liegt zwischen 0.05 bis 15 %. Im Idealfall ist der EOF bei dieser Technik vollständig
unterdrückt und hat keinen Einfluss auf die Mobilität.
3.4.5 Eigenschaften von “fused silica” Oberflächen
Bilden sich ausreichend große ζ-Potenziale auf der Quarzoberfläche der Kapillare aus,
besitzt die Kapillarwand Eigenschaften eines Kationenaustauschers mit etwa einer