Methoden zur Evaluation von Zytotoxizit¨at und Struktur ... - OPUS

46 3. Theoretische Grundlagen
Abbildung 3.7:
Schematischer Aufbau
einer CE-Apparatur.
3.4.1.1 Injektion
Zur Probeninjektion wird am aufgabeseitigen Ende der Kapillare das Gefäß mit Trenn-
elektrolyt gegen das Probengefäß getauscht. Das injizierte Probenvolumen liegt meist
zwischen 2 und 20 nl. Die Probenaufgabe kann anodisch oder kathodisch erfolgen.
Man unterscheidet die folgenden drei Injektionstechniken:
• Elektrokinetische Injektion durch elektrisches Feld:
Aufgrund einer kurzzeitig angelegten Spannung U zwischen den beiden Kapil-
larenden, wird in der Kapillare eine Flüssigkeitsströmung erzeugt, wodurch Pro-
benbestandteile in die Kapillare wandern.
• Hydrostatische Injektion durch Siphon-Effekt:
Eine Höhendifferenz ∆h zwischen den beiden Kapillarenden wird für eine kur-
ze Zeitspanne aufgebaut. Der daraus resultierende Fluss zieht die Probe in die
Kapillare.
• Hydrodynamische Injektion durch Druck bzw. Vakuum:
Eine kurzzeitig aufgebaute Druckdifferenz ∆p zwischen den beiden Kapillaren-
den ist für die Probenaufgabe verantwortlich. Für den Aufbau der Druckdiffe-
renz kann entweder der Druck beim Probengefäß erhöht werden oder am Kapil-
larende verringert werden.
Die hydrodynamische Injektion ist das am häufigsten angewandte Verfahren und wird
auch in dieser Arbeit eingesetzt. In der Regel werden Injektionszeiten zwischen 5 und
45 s verwendet.