Methoden zur Evaluation von Zytotoxizit¨at und Struktur ... - OPUS

144 4. Ergebnisse und Diskussion
biern eine Bakterienspezifizität. Damit besteht die Möglichkeit T2-Kurven zur Erstel-
lung mikrobieller Fußabdrücke (”footprints”) zu nutzen.
Abbildung 4.58: T2-Wachstumskurve
von E. coli in
BHI-Medium bei 30 ◦ C und
17.6 T
T2 [ms]
100
95
90
85
80
75
E.coli
Medium
70
0 500 1000 1500
t [min]
2000 2500 3000
4.4.4 Analyse der Zellproliferation von S. vestibularis
Von den analysierten Bakterienspezies eignete sich S. vestibularis am besten zur Un-
tersuchung der Korrelation zwischen transversaler Relaxation und Zellwachstum und
damit zur Untersuchung des physikalischen Hintergrundes. Zur Quantifizierung und
Interpretation der Änderung des Parameters T2 mit zunehmender Zellzahl wurden
NMR-Bildgebung und -Spektroskopie miteinander kombiniert und von einem Satz
von Bakterienproben neben der transversalen Relaxation
• der pH-Wert (sensitiver Parameter zur Beschreibung der Stoffwechselaktivität),
• die optische Dichte bei 600 nm, OD600 (Charakteristikum für die Zellzahl), und
• 1 H-NMR-Spektren
zu unterschiedlichen Inkubationszeiten über einen Zeitraum von 12 h gemessen. Da-
durch war es möglich, stoffwechselbedingte Änderungen der Metaboliten-, Aminosäu-
re- und Proteinkonzentration im extrazellulären Kulturmedium zeitlich mitzuverfol-
gen. Die Bildgebungsexperimente wurden bei 17.6 T durchgeführt, die Protonenspek-
tren bei 9.4 T aufgezeichnet.
4.4.4.1 Korrelation zwischen T2, Zellzahl und pH
Der Probensatz bestand aus sechs 5 mm-NMR-Röhrchen, die mit 2 ml Zellsuspension
des Streptococcus-Stammes mit einer Anfangskonzentration von 0.015 OD600 gefüllt