Methoden zur Evaluation von Zytotoxizit¨at und Struktur ... - OPUS
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4.2 Kapillarelektrophoretische Methode <strong>zur</strong> Analyse intakter Mikroorganismen 115<br />
4.2.12 Fazit: CE-Analyse <strong>von</strong> Mikroorganismen<br />
• Die CE-Methode bewies sich in guter Präzision, Selektivität, Spezifizität, Linea-<br />
rität <strong>und</strong> in einem weiten Anwendungsbereich. (Trennpuffer: 0.78 mM Tris-<br />
Borat, 0.018 mM Na2EDTA <strong>und</strong> 0.0125% PEO bei einem pH <strong>von</strong> 8.7; polyme-<br />
re Matrix: PEO 600.000 wurde in einer Konzentration <strong>von</strong> 0.5 % bei 30 ◦ C für<br />
mindestens 12 h gelöst <strong>und</strong> anschließend mit Puffer auf 0.0125 % verdünnt; CE-<br />
Bedingungen: Quarzkapillare mit einer Gesamtlänge <strong>von</strong> 31.5 cm <strong>und</strong> einer De-<br />
tektionslänge <strong>von</strong> 21 cm, konstant angelegte Spannung <strong>von</strong> 10 kV, Temperatur 23<br />
◦ C, anodische Probeninjektion durch Anlegen eines Druckes <strong>von</strong> 0.5 psi für 10 s,<br />
Detektion bei 214 nm; Bakterienproben <strong>und</strong> Puffer: Neue Herstellung vor jeder<br />
Messung; eine Zellkonzentration <strong>von</strong> 0.5 OD600)<br />
• Die Probenpräparation muss dem Mikroorganismus entsprechend individuell<br />
optimiert werden.<br />
• Die Grenze der Reproduzierbarkeit der kapillarelektrophoretischen Analyse in-<br />
takter Mikroorganismen ergibt sich aufgr<strong>und</strong> der statistischen Verteilung der<br />
Gr<strong>und</strong>gesamtheit einer Bakterienpopulation.
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