Methoden zur Evaluation von Zytotoxizit¨at und Struktur ... - OPUS

146 4. Ergebnisse und Diskussion
Messung. Insgesamt wurde der OD und pH-Wert 1.8 h, 3.1 h, 4.3 h, 5.5 h, 6.7 h, 8.1 h
und 11.6 h nach Herstellung der Inokula gemessen und in einem Diagramm in Ab-
bildung 4.60 aufgetragen. Mit zunehmender Zellzahl, d. h. mit steigendem OD-Wert
fällt der pH stetig und stagniert in der stationären Phase des Bakterienwachstums. Die
T2-Kurve steigt, wie bereits in Abschnitt 4.4.3 beschrieben, nach initialem Abfall steil
an und endet ebenfalls in einem Plateau in der stationären Phase. Die Stagnation der
OD-, pH und T2-Werte beginnt nahezu zum gleichen Zeitpunkt und indiziert die Ein-
stellung der Bakterienproliferation.
4.4.4.2 Komponenten im BHI-Medium
Der erste Schritt zur Aufklärung der physikalischen Zusammenhänge bestand in der
Identifizierung maßgeblicher Komponenten im BHI-Vollmedium. Dieses Vollmedium
besitzt eine komplexe Zusammensetzung und besteht unter anderem aus Kalbs-Hirn-
und Rinder-Herz-Extrakt und Pepton (Abschnitt 5.1.7.2.2). Die Komponenten-Analyse
erfolgte anhand eines 1D- 1 H-Spektrums und 2D-COSY-Diagramms, welche bei 9.4 T
gemessen wurden (Abbildung 4.61). Die Ergebnisse sind in Tabelle 4.7 zusammen-
gefasst und ergeben sich in Anlehnung an die Arbeiten von Govindaraju [109], Lin-
don [160] und Evans [89]. Im COSY- und 1D-Spektrum sind die identifizierten Sub-
stanzen nummeriert aufgeführt. Neben zahlreichen Aminosäuren und Kohlenhydra-
ten konnten die fünf Hauptmetabolite des anaeroben Stoffwechsels Acetat, Ethanol,
Formiat, Laktat und Succinat zugeordnet werden.
HO
HO
HO
4
4
HO
4
4
Struktur Funktionelle chem. Versch.
6
CH 2 OH
3
2
5
2
α-Glukose
6
CH 2 OH
3
2
5
2
O
1
OH OH
O
OH
β-Glukose
1
OH
Gruppe (ppm) in
1 CH
2 CH
3 CH
4 CH
5 CH
6 CH
1 CH
2 CH
3 CH
4 CH
5 CH
6 CH
H2O + 10 % D2O
5.2
3.5
3.7
3.4
3.8
nicht aufgelöst
4.6
3.2
nicht aufgelöst
nicht aufgelöst
3.4
3.8