Methoden zur Evaluation von Zytotoxizit¨at und Struktur ... - OPUS

26 1. Einleitung
durch den MIC(minimum inhibitory concentration)-Wert charakterisiert. Dieser ent-
spricht der Wirkstoffkonzentration, ab welcher gerade kein sichtbares Zellwachstum,
d. h. keine Trübung mehr zu erkennen ist. In anderen antimikrobiellen Testverfahren
auf der Basis der Fluorimetrie und Kolorimetrie wird die Aktivität einer Substanz zu-
meist als ED50(effective dose, 50%)-Wert angegeben. Die Variable wird häufig auch
als IC50(inhibitory concentration, 50%)- oder EC50(effective concentration, 50%)-Wert
bezeichnet und definiert diejenige Wirkkonzentration, die zu einer halbmaximalen In-
hibition oder Abtötung führt.
Sowohl bei der turbidimetrischen Detektion als auch bei den meisten fluorimetrischen
oder kolorimetrischen Methoden wird jedoch die Gesamtzellzahl erfasst, wodurch
eine Differenzierung der antimikrobiellen Wirksamkeit in statisch und toxisch nicht
möglich ist. In der Bakteriologie erfolgt diese meist in einem zweiten Schritt durch
Auszählung koloniebildender Einheiten (colony forming units, CFU) auf Agarplatten,
in der Parasitologie dagegen durch mikroskopische Betrachtung und Untersuchung
der Erreger auf Beweglichkeit. Beide Verfahren sind sehr zeitintensiv und es besteht
Bedarf an schnellen Testverfahren mit hoher Aussagekraft und Differenzierbarkeit.
Ein weiterer Nachteil der optischen Detektion eines Probenarrays in Mikrotiterplatten
ist die fehlende Möglichkeit senkrecht zum einfallenden Licht zu detektieren. Dadurch
sind nephelometrische Methoden ausgeschlossen und fluorimetrische stark limitiert.
Hinzu kommt, dass die Detektion des Lichtes aus einer Vertiefung durch Streulicht
aus der Umgebung gestört werden kann, wodurch Interesse an alternativen Detekti-
onsmethoden besteht.