Methoden zur Evaluation von Zytotoxizit¨at und Struktur ... - OPUS

48 3. Theoretische Grundlagen
Die Auflösung Rs und Anzahl N der theoretischen Böden werden nach folgenden Glei-
chungen berechnet:
Abbildung 3.8: Beiträge zur Auflösung, modifiziert
nach [77].
D. h. je größer die Peakbreite bei halber Höhe (W1/2) ist, desto niedriger ist der Wert für
N. Für eine hohe Auflösung müssen somit sowohl schmale Peaks als auch große Peak-
zu-Peak-Trennungen vorliegen. Während der Trennung kommt es häufig zur Disper-
sion des Analyten, wodurch Peakverbreiterungen verursacht werden. Diesem Effekt
kann jedoch durch “sample stacking” (Abschnitt 3.4.1.2) entgegengewirkt werden.
3.4.2 Trennprinzip
Die Trennung verschiedener Analyten im elektrischen Feld beruht auf ihrer un-
terschiedlichen elektrophoretischen Mobilität µelphor (Quotient aus Wanderungsge-
schwindigkeit und Feldstärke). Sie errechnet sich aus dem Kräftegleichgewicht zwi-
schen der Beschleunigungskraft Fel des elektrischen Feldes und der Reibungskraft Fr,
die durch das Stokesche Gesetz angenähert wird:
mit
Fel = q · E (3.10)
Fr = −k · µelphor · E = −6 · π · η · r · µelphor · E (3.11)
µelphor =
q
6 · π · η · r
q : effektive Ladung
∼ q
r
E : elektrische Feldstärke
k : Reibungskoeffizient
η : dynamische Viskosität
r : Stokescher Radius, der auch die Solvathülle beinhaltet
(3.12)
Die Zahl 6 gilt streng genommen nur für die Betrachtung sphärischer Partikel und ist
für kleine Ionen, deren Größe im Bereich von Lösungsmittelmolekülen liegt kleiner.