Methoden zur Evaluation von Zytotoxizit¨at und Struktur ... - OPUS

156 4. Ergebnisse und Diskussion
Unter der Annahme einer maximalen Relaxationszeit von 3 s und Einbeziehung des
bei der Messung verwendeten Relaxationsdelays von 2 s berechnet sich der Fehler im
Metabolitengehalt zu 22 %, womit die Nährstoffkonzentration immer noch mindestens
um einen Faktor 39 höher liegt.
Metabolit Gehalt* Gehalt*
(t = 0h) (t = 12h)
Formiat 0.12 0.52
Acetat 0.74 2.40
Succinat 1.37 0.92
Laktat
Dublett
0.25
0.24
Quartett
nicht detektierbar
Dublett
1.78
1.70
Quartett
Tabelle 4.8: Quantifizierung der Metaboliten zu den Zeitpunkten t=0 h und t=12 h der Wachstumskurve
von S. vestibularis. *Der Gehalt wurde durch Integration der Spektren in Abbildung 4.63 bestimmt und
ist als Fläche unter der Kurve relativ zum Maleinsäuresignal (interner Standard, 1 mg/ml) angegeben.
4.4.4.4.5 Maßgebende Einflussfaktoren
In den letzten Abschnitten konnte der Nährstoffverzehr und die Beeinflussung der
chemischen Austauschrate durch den pH-Wert als Hauptursachen für die beobach-
teten Änderungen der transversalen Relaxation während der Zellproliferation iden-
tifiziert werden. Zur Verifizierung der Ergebnisse wurden zu den gemessenen pH-
Werten in Abbildung 4.60 die entsprechenden T2-Werte aus Abbildung 4.65 abgele-
sen und zusammen mit der gemessenen T2-Kurve aus Abbildung 4.59 in einem Dia-
gramm aufgetragen (Abbildung 4.66). In den ersten 5 h bis zum Erreichen des globalen
T2-Minimums von 70 ms sind die aus der pH-Kalibrierung des Mediums errechnete
und gemessene T2-Kurve nahezu deckungsgleich. In dieser Zeitspanne erhöhte sich
die Metabolitenkonzentrationen von Formiat, Acetat, Succinat und Laktat nur schlei-
chend und bewirkten lediglich eine pH-Absenkung um ca. 0.5 Einheiten (Abbildung
4.62). Betrachtet man die Wachstumskurve in Abbildung 4.60, so ist in diesem Stadium
mit einem OD600 von 0.416 die Hälfte des maximalen Zellwachstums erreicht und die
Bakterienpopulation befindet sich mitten in der exponentiellen Phase. Durch die ex-
ponentielle Zellproliferation setzt ab einer Inkubationszeit von 5 h beschleunigte Me-
0.24
0.37
0.34
0.18