Methoden zur Evaluation von Zytotoxizit¨at und Struktur ... - OPUS

94 4. Ergebnisse und Diskussion
Abbildung 4.19: Auswirkung
verschiedener TBE-Puffer-Konzentrationen
auf die Trennung
unterschiedlich großer Aggregate
von M. luteus. Der
Trennpuffer enthielt 0.0125 %
PEO mit (A) 0.11 mM Tris-Borat
und 0.003 mM Na2EDTA,
(B) 0.56 mM Tris-Borat und
0.013 mM Na2EDTA, (C)
0.78 mM Tris-Borat und
0.018 mM Na2EDTA, bei einem
pH-Wert von 8.7. Für
CE-Bedingungen und Probenpräparation
siehe Abbildung
4.17.
Abbildung 4.20: Auswirkung
der hohen Ionenenstärke des
TBE-Puffers I auf die Migrationszeit
von M. luteus. Der
Trennpuffer enthielt 0.0125 %
PEO mit 3.89 mM Tris-Borat und
0.0875 mM Na2EDTA bei einem
pH-Wert von 8.7. Für CE- und
Probenbedingungen siehe Abbildung
4.17.
werden konnte (Abbildung 4.20).
⇒ Die Zusammensetzung des Trennpuffers wurde auf 0.78 mM Tris-Borat und
0.018 mM Na2EDTA optimiert. Die Lösung enthielt 0.0125 % PEO und ergab einen
pH von 8.7
4.2.6.3.2 PEO Konzentration und Viskosität
Zur dynamischen Beschichtung wird nach Armstrong 0.0125 % PEO 600.000 als po-
lymere Matrix verwendet. Dazu verdünnt man eine 0.5 %ige PEO-Stammlösung, die
zum effizienteren Lösen einer vierstündigen Ultraschallbehandlung ausgesetzt wird.
In der Routine-Herstellung zeigten sich jedoch Probleme in der Reproduzierbarkeit
der Viskosität der polymeren Lösung. In Abbildung 4.21 sind die Elektropherogram-
me a und b zweier identisch präparierter M. luteus-Proben unter Verwendung der bei-
den PEO-Lösungen 1 und 2, hergestellt nach der gleichen Vorgehensweise, dargestellt.
Das Elektropherogramm a zeigt zwar mit ca. 400.000 theoretischen Böden/m eine gu-