Methoden zur Evaluation von Zytotoxizit¨at und Struktur ... - OPUS

4.4 Transversale Relaxation als Indikator für Zellwachstum 159
Probensatz wurde die transversale Relaxation über einen Zeitraum von 12 h bei 30 ◦ C
und 17.6 T simultan gemessen.
T 2 [ms]
125
120
115
110
105
100
95
90
85
80
75
control
medium
0.01 µM
0.1 µM
1 µM
10 µM
100 µM
70
100 200 300 400
t [min]
500 600 700
Abbildung 4.68: T2-Wachstumskurven
von S. vestibularis unter
dem Einfluss unterschiedlicher
Vancomycin-Konzentrationen,
gemessen bei 30 ◦ C und 17.6 T.
Das Diagramm in Abbildung 4.68 zeigt die T2-Kurven der jeweiligen Proben. Bei den
Bakterienproben in Gegenwart von Vancomycin-Konzentrationen ≥ 1 µM wurde kei-
ne zeitliche Veränderung der transversalen Relaxation festgestellt und damit kein Zell-
wachstum beobachtet. Hingegen zeigten die Bakteriensuspensionen bei einem Vanco-
mycin-Gehalt unter ≤ 0.1 µM gegenüber der Positivkontrolle keinen Unterschied in
ihrer Wachstumscharakteristik. Zur genaueren Untersuchung des Konzentrationsbe-
reiches 0.1 µM bis 1 µM wurde das Experiment mit intermediären Zwischenstufen (1:8,
2:8 etc. Verdünnungsstufen) wiederholt. Auch hier zeigte die inhibitorische Wirkung
des Vancomycin ein typisches Schwellenverhalten ohne Zwischenzustände. Diese soll-
ten sich in einer unterschiedlichen Steigung und einer zeitlichen Verzögerung der T2-
Kurven bemerkbar machen. Gemittelt über drei Messwerte wurde der MIC-Wert zu
0.33 ± 0.08 µM bestimmt. Dies entspricht einer Standardabweichung von 24.2 %. Ver-
glichen mit den Ergebnissen aus der FMR- (ED50=2.4 ± 0.7 µM) LIF-CE- (ED50=0.24
± 0.07 µM) und der Mikrodilutionsmethode nach DIN 58940-8 [2] (MIC=0.7 µM) liegt
dieses Ergebnis im gleichen Größenbereich. Die Eignung von T2 als Marker für Zell-
wachstum im Rahmen eines “in-vitro-whole-cell-bioassays” und die Richtigkeit der
Methode sind damit zunächst bestätigt.
4.4.5.4 Potenzial-Praktikabilität-Ausblick
MRI als Methode zur Detektion mikrobiellen Wachstums eröffnet in High-
Throughput-Screening-Verfahren eine neue Perspektive. Miniaturisierung, Paralleli-
sierung und Automatisierung, die Schlüsselfaktoren für Methoden mit hohem Test-
durchsatz können in der MRI in hohem Maße erfüllt werden. In der Bildgebung ist