Methoden zur Evaluation von Zytotoxizit¨at und Struktur ... - OPUS

136 4. Ergebnisse und Diskussion
4.3.6 Möglichkeiten und Grenzen
4.3.6.1 Lösungsmittel-Effekt und Wirkmechanismus
Zur Überprüfung der Eignung der beiden neuen Screening-Verfahren wurden zwei
weitere, in Abbildung 4.54 abgebildete Antibiotika zur Testung ausgewählt:
• Ofloxacin gegen P. fluorescens:
Ofloxacin ist wie Ciprofloxacin ein 4-Chinolon-3-carbonsäure-Derivat und gehört
ebenfalls zur Gruppe der Gyrase-Hemmstoffe. Es ist im Gegensatz zu Ciprofloxa-
cin in Wasser schlecht löslich. Eine ausreichende Löslichkeit ist nur in Gegenwart
schwacher Säuren oder Laugen gegeben, womit der Einfluss von Lösungsmitteln
auf die Testung und Fluoreszenzemission geprüft werden konnte.
• Ampicillin-Na gegen S. vestibularis:
Dieses Penicillin-Derivat ist ein Hemmstoff der Zellwandsynthese. Es hemmt das
Enzym Transpeptidase, welches die Aminozuckerketten in der Zellwand ver-
knüpft. Die Folge kann ein Anschwellen und Platzen der Zellen sein. Das Test-
verfahren konnte somit bei einem weiteren antibiotischen Wirkmechanismus an-
gewandt werden. Ampicillin-Na ist sehr gut wasserlöslich.
Penicillin
COO
-
O
N
R
H H
S
CH 3
CH 3
*
H N 3 H
+
Ampicillin
O
O
N
H
N
H H
COO
-
S
CH 3
CH 3
C
H 3
N
F
N
Ofloxacin
O
O
N
*
CH 3
COOH
Abbildung 4.54: Strukturen der Arzneistoffe, die zur Überprüfung der Eignung der FMR- und LIF-CE-
Methode eingesetzt wurden.
Zur Bestimmung der antiinfektiven Wirksamkeit wurde Ofloxacin in 0.1 M NaOH und
Ampicillin-Na in H2O gelöst. Tabelle 4.6 fasst alle bisher ermittelten ED50 und MIC-
Werte aus der FMR-, LIF-CE-Methode und dem Mikrodilutionsverfahren und die ver-
wendeten Lösungsmittel zusammen. Die Bestimmung der ED50-Werte wurde zwei-
mal wiederholt. Die MIC-Werte wurden dagegen nur einmal gemessen und standen
auch für Ampicillin und Ofloxacin in Einklang zu berichteten Ergebnissen [102, 122].
Die antibiotische Wirkung von Ciprofloxacin auf P. fluorescens und Ampicillin und Van-
comycin auf S. vestibularis führte unter allen drei Testmethoden zu ähnlichen Ergebnis-
sen: Während die ED50-Werte des Ciprofloxacins den MIC-Wert sehr gut wiedergaben,
zeigten beide ED50-Werte des Ampicillin und bei Vancomycin der ED50-Wert mittels