Methoden zur Evaluation von Zytotoxizit¨at und Struktur ... - OPUS

118 4. Ergebnisse und Diskussion
C
H 3
(CH 2 ) 3
N
CH
O N + CH 3
I
N
H 2
N +
(CH 2 ) 3
NH 2
C 2 H 5
N +
C 2 H 5
SYTO9: Propidiumiodid:
Anregungsmaximum: 480 nm Anregungsmaximum: 490 nm
Emissionsmaximum: 500 nm Emissionsmaximum: 635 nm
Abbildung 4.40: Chemische Strukturen und spektrale Eigenschaften der beiden Komponenten SYTO9
und Propidiumiodid des “LIVE/DEAD BacLight Bacterial Viability Kits” L-7012. Im Kit liegt SYTO9 in
3.34 mM und Propidiumiodid in 20 mM Konzentration, jeweils gelöst in DMSO, vor [4].
fordert eine routinemäßige Anwendung zunächst eine solide Validierung der Fluores-
zenzmarkierung.
4.3.3 Auswahl des Testsystems
Zum Aufbau neuer Testverfahren zur Bestimmung bakterizider Wirksamkeit eini-
ger Antiinfektiva mittels SYTO9- und Propidiumiodid-Markierung wurden die bei-
den Teststämme P. fluorescens und S. vestibularis ausgewählt. Sie wurden im vorher-
gehenden Kapitel bereits kapillarelektrophoretisch analysiert, wodurch die Entwick-
lung zweier orthogonaler Methoden mittels FMR und LIF-CE möglich sein sollte. Die
Etablierung und Validierung neuer Methoden erfordert aber auch den Einsatz in der
Literatur gut dokumentierter Referenzsubstanzen. Die dafür geeigneten Antibiotika
sollten:
• Bakterizid wirksam sein,
• Über eine gute Wasserlöslichkeit verfügen, um zunächst eine Lösungsmittel be-
dingte Zytotoxizität ausschließen zu können und
• Unterschiedliche Angriffspunkte und Wirkmechanismen besitzen, die sich even-
CH 3
2 I