Methoden zur Evaluation von Zytotoxizit¨at und Struktur ... - OPUS

176 6. Zusammenfassung
Kapitel 6
Zusammenfassung
Im Rahmen dieser Arbeit wurden potenzielle Wirksubstanzen zur Behandlung trypa-
nosomaler und bakterieller Infektionen gesucht. Während auf dem Gebiet der Trypa-
nosomiasis das Ziel in der Testung großer Substanzbibliotheken auf antitrypanosoma-
le Wirkung und in der Erstellung von Struktur-Wirkungs-Beziehungen bestand, lag im
Bereich der bakteriellen Infektion der Schwerpunkt in der Entwicklung neuer Testme-
thoden.
Zu diesem Zweck wurde im ersten Teil der Arbeit mit dem AlamarBlue-Bioassay ein
In-vitro-High-Throughput-Screening-Verfahren zur antitrypanosomalen Aktivitätsbe-
stimmung verschiedener Substanzklassen etabliert (Abschnitt 4.1). In der Gruppe der
Naphthylisochinolin-Alkaloide (NIQs) mit C,C-verknüpfter Biaryl-Achse (Abschnitt
4.1.4.1.1) zeigten Dioncophyllin A (ED50=3.4±1.7 µM), B (ED50=2.6±0.4 µM) und C
(ED50=4.2±2.3 µM) sowie das dimere Ancistrogriffithin A (ED50=0.85±0.05 µM) die
stärkste Aktivität gegen Trypanosoma brucei brucei und lagen damit im Wirkbereich
des Nifurtimox (ED50=3.4±0.4 µM). Wie am Beispiel des unwirksamen dimeren Mi-
chellamin B mit sechs freien Hydroxy-Gruppen gezeigt werden konnte, war für ei-
ne gute antitrypanosomale Wirksamkeit die begrenzte Anzahl phenolischer Gruppen
auf eine oder zwei maßgeblich. Untersuchungen am Isochinolin-Gerüst ergaben, dass
unter diesen Bedingungen auch vereinfachte Analoga ohne Naphthalin-Einheit aktiv
sind. Mit Ancistrocladinium B, ein NIQ mit N,C-verknüpfter Hetero-Biaryl-Achse (Ab-
schnitt 4.1.4.1.2) konnte ein neuer in der antitrypanosomalen Aktivität wirksamerer
Alkaloidtypus gefunden werden (ED50= 0.35±0.02 µM). In dieser Gruppe zeigte sich
von phenyl- zu anthracensubstituierten Isochinolinen eine größere Wirksamkeit, die
sich durch zunehmende Lipophilie erklären ließ. Der Einfluss der Hydroxy-Gruppe
auf die antitrypanosomale Wirkung konnte auch am Beispiel der Fluorchinolone (Ab-
schnitt 4.1.4.2) nachgewiesen werden. Für wirksame Substanzen war somit auch das
Lipinski Kriterium [161] für “drug-like”-Substanzen erfüllt.
Im zweiten Teil dieser Arbeit wurden zum konventionell angewandten Mikrodilu-
tionsverfahren nach DIN 58940-8 [2], alternative und ergänzende Methoden zur Be-