Manual de Laboratorio de Fisiologia

180 Manual de laboratorio de fisiología
Grupo AB %
Grupo Rh+ %
Grupo Rh− %
¿Coinciden estos resultados con los que aparecen en la literatura
para la raza caucásica?
Explique el mecanismo de la herencia de los grupos sanguíneos.
Explique cómo adquiere el ser humano las aglutininas anti-A,
anti-B y anti-Rh.
¿Qué grupo sanguíneo pueden presentar los padres de un sujeto
con grupo O+?
¿Qué tipo de sangre pueden tener los padres de un sujeto Rh−?
En una situación de urgencia en la que no es posible determinar el
grupo sanguíneo de un paciente, ¿qué tipo de sangre se le administra
y por qué?
Pruebas cruzadas
• Seleccione a tres alumnos con grupos sanguíneos A, B y O.
• Extráiganse 15 ml de sangre venosa de cada uno de ellos.
• Cada muestra de sangre se coloca en tres tubos de ensayo,
5 ml en cada uno. El primero y el segundo tubos de ensayo,
marcados como Suero, carecen de anticoagulantes. El tercer
tubo, marcado como Eritrocitos, sí contiene anticoagulantes
y debe taparse e invertirse suavemente varias veces para
mezclar la sangre e impedir su coagulación. Los tres tubos se
marcan con el grupo sanguíneo correspondiente y se dejan en
reposo durante 30 min, tiempo necesario para que la sangre
de los tubos marcados como Suero coagule y el coágulo se
retraiga.
• Centrifúguense los tubos de ensayo durante 3 min. En los tubos
marcados como Suero, el líquido sobrenadante es suero,
en tanto que en el tubo marcado Eritrocitos, el líquido sobrenadante
es plasma. Elimínese el plasma con una pipeta de
plástico, ya que sólo se utilizarán los glóbulos rojos. De esta
manera se obtienen suero y eritrocitos de cada uno de los
grupos: A, B y O.
• En las gradillas que se encuentran en cada mesa de laboratorio
hay un tubo con solución salina. Con otra pipeta de plástico
tómense eritrocitos del tubo de ensayo marcado Eritrocitos
y deposítese la cantidad necesaria para que la solución salina
adquiera el color del jugo de tomate. Esta solución se utilizará
como fuente de eritrocitos para las pruebas cruzadas; márquese
el tubo de ensayo con el grupo sanguíneo.
• En la misma gradilla se encuentran tubos de ensayo vacíos
marcados como Suero A, B y O. Con una pipeta de plástico tómese
de uno de los tubos de ensayo con suero aproximadamente
1 ml y deposítese en el tubo correspondiente. Con los
tubos que contienen 1 ml de suero y el tubo que contiene la
solución de eritrocitos se realizarán las pruebas cruzadas. El
otro tubo con suero sirve de testigo para todo el procedimiento.
• Realícense las pruebas cruzadas para las siguientes combinaciones
de donador y receptor:
Receptor A y donador B
Receptor O y donador A
Receptor A y donador O
Receptor O y donador O
• Márquense los tubos para las pruebas mayor y menor de cada
caso; por ejemplo, Mayor AB y Menor AB para el primer caso;
también márquese un tubo como Autotestigo para cada combinación.
• En cada caso, mézclense las muestras de la siguiente manera:
Prueba mayor: suero del receptor (4 gotas) + glóbulos rojos
del donador (1 gota).
Prueba menor: suero del donador (4 gotas) + glóbulos rojos
del receptor (1 gota).
Autotestigo: suero del receptor (4 gotas) + glóbulos rojos del
receptor (1 gota).
• Al llevar a cabo las mezclas anteriores se deben usar pipetas
de plástico diferentes para cada toma.
• Inmediatamente después se centrifugan los tubos de ensayo
de la prueba mayor, la menor y el autotestigo durante 3 minutos.
Búsquese en cada tubo la presencia de aglutinación
o hemólisis, lo que se informa como positivo. En los tubos
negativos se sigue adelante con el procedimiento. El tubo autotestigo
siempre debe ser negativo; si hay aglutinación es
necesario repasar el procedimiento; tal vez se hayan confundido
o contaminado las muestras.
• Colóquese el tubo o los tubos en un baño de agua a temperatura
de 37°C durante 15 minutos y vuélvase a buscar aglutinación
o hemólisis agitando suavemente. Si la prueba mayor
es negativa en este momento, se informa como negativa y se
continúa con la prueba de Coombs.
• El tubo con la prueba cruzada mayor se centrifuga y lava tres
veces con cinco gotas de solución salina y se descarta el sobrenadante
en cada lavado.
• Por último, añádanse dos gotas de antiglobulina antihumana
(suero de Coombs), mezcle e incube durante 5 minutos.
• Centrifugue el tubo de nuevo durante 3 minutos, observe en
busca de aglutinación o hemólisis e informe el resultado.