Manual de Laboratorio de Fisiologia
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52 <strong>Manual</strong> <strong>de</strong> laboratorio <strong>de</strong> fisiología<br />
que los requisitos <strong>de</strong> seguridad son distintos a los <strong>de</strong> o tros<br />
estimuladores. En g eneral, el eq uipo electrónico aprobado<br />
para empleo en h umanos lo esp ecifica mediante símbolos<br />
visibles en la pa rte frontal. El equipo Power Lab <strong>de</strong> ADInstruments,<br />
en el que se basan las prácticas <strong>de</strong> este manual, usa<br />
los siguientes:<br />
Protección corporal. Este símbolo significa<br />
que el equipo pue<strong>de</strong> conectarse directo al cuerpo,<br />
siempre y cuando no se establezca una conexión<br />
directa al corazón.<br />
Protección cardíaca. Este símbolo <strong>de</strong>nota que<br />
el equipo pue<strong>de</strong> conectarse directo al cuerpo,<br />
aun cuando se establezca una conexión eléctrica<br />
directa al corazón.<br />
Por lo tanto, cada vez que se vaya a usar equipo con seres<br />
humanos, verifíquese que fue diseñado para ello. La figura<br />
10.2 presenta un estimulador para empleo en humanos con<br />
el signo <strong>de</strong> protección corporal visible al frente.<br />
Los estimuladores son <strong>de</strong> muy diversos tipos, pero todos<br />
comparten la posibilidad <strong>de</strong> establecer los parámetros básicos<br />
<strong>de</strong>l estímulo: intensidad, duración y frecuencia. A<strong>de</strong>más<br />
<strong>de</strong> estos parámetros y <strong>de</strong> acuerdo con el estimulador, pue<strong>de</strong>n<br />
establecerse algunos más, co mo número <strong>de</strong> estímulos, duración<br />
<strong>de</strong> la estim ulación, estímulos sencillos, dobles o en<br />
trenes, entre otros.<br />
La intensidad <strong>de</strong>l estímulo se establece en amperios o en<br />
voltios, por lo general en mV y mA, s egún el equipo y los fines<br />
que se persiguen. La duración representa el tiempo que<br />
el estímulo persiste, es <strong>de</strong>cir, cuánto dura la a plicación <strong>de</strong>l<br />
voltaje o amperaje seleccionado; las duraciones que se usan<br />
más a menudo se mi<strong>de</strong>n en milisegundos (ms). La frecuencia<br />
constituye las veces que se aplica el estímulo por segundo y<br />
se mi<strong>de</strong> en H z. Para obtener una misma r espuesta, la duración<br />
y la in tensidad <strong>de</strong>l estímulo varían en relación inversa;<br />
esto quiere <strong>de</strong>cir que si la intensidad se aumenta, la duración<br />
<strong>de</strong>be disminuirse, y vice versa. Esta relación se observa con<br />
claridad mediante una c urva <strong>de</strong> intensidad-duración, como<br />
la que se realizó en la p ráctica 8. Asimismo, al est ablecer la<br />
frecuencia, <strong>de</strong>be consi<strong>de</strong>rarse la duración <strong>de</strong>l estímulo, pues<br />
la multiplicación <strong>de</strong> los dos no <strong>de</strong>b e ser superior a 1 000 m s.<br />
Por ejemplo, si s e aplica un estím ulo con una d uración <strong>de</strong><br />
Figura 10.2<br />
Estimulador diseñado para empleo en humanos con el<br />
símbolo <strong>de</strong> protección corporal.<br />
200 ms, la máxima frecuencia que pue<strong>de</strong> utilizarse es <strong>de</strong> 5 Hz,<br />
ya que en 1 s (1 000 ms) no pue<strong>de</strong> haber más <strong>de</strong> cinco estímulos<br />
con una duración <strong>de</strong> 200 ms. Si la duración <strong>de</strong>l estímulo es<br />
<strong>de</strong> 500 ms, la frecuencia máxima es <strong>de</strong> 2 H z; cuando la duración<br />
es <strong>de</strong> 100 ms, la frecuencia máxima es <strong>de</strong> 10 Hz; si la duración<br />
es <strong>de</strong> 250 ms, entonces es <strong>de</strong> 4 Hz, etcétera.<br />
Electrodos <strong>de</strong> estimulación<br />
Los electrodos <strong>de</strong> estimulación sirven para llevar el estímulo<br />
eléctrico hasta el órgano, tejido o sujeto <strong>de</strong> experimentación,<br />
por lo que <strong>de</strong>ben ser <strong>de</strong> un material que conduzca en forma<br />
a<strong>de</strong>cuada la corriente eléctrica. Son <strong>de</strong> diferente tipo: capilares<br />
<strong>de</strong> vidr io llenos co n una s olución electrolítica, como<br />
KCl; <strong>de</strong> plata clorurada, y <strong>de</strong> p latino; incluso los alfileres o<br />
las agujas <strong>de</strong> laboratorio pue<strong>de</strong>n usarse como electrodos <strong>de</strong><br />
estimulación según el experimento que se realice. La figura<br />
10.3 muestra un ejemplo <strong>de</strong> electrodo para estimulación en<br />
seres humanos.<br />
Electrodos <strong>de</strong> registro<br />
Los tejidos producen potenciales eléctricos, como el potencial<br />
<strong>de</strong> membrana y los p otenciales <strong>de</strong> acción, que se registran<br />
mediante electrodos que unen el órgano, tejido o sujeto<br />
a un sistema que <strong>de</strong>tecta el cambio <strong>de</strong> voltaje o el flujo <strong>de</strong><br />
corriente en relación con el tiempo. Como el voltaje es una<br />
diferencia <strong>de</strong> cargas entre dos puntos, para su medición se<br />
requieren dos electrodos dispuestos en sitios distintos. Pue<strong>de</strong>n<br />
obtenerse registros unipolares o bipolares según el sitio<br />
en que se instalen los electrodos.<br />
El registro unipolar se utiliza cuando se mi<strong>de</strong>n cambios<br />
<strong>de</strong> voltaje en sitios muy localizados; por ejemplo, registros<br />
intracelulares o extracel ulares <strong>de</strong> células aisladas. En est e<br />
caso, el electrodo <strong>de</strong> registro se coloca en el tejido en el que<br />
interesa medir el ca mbio <strong>de</strong> voltaje; este cambio se compara<br />
con un segundo punto con estabilidad eléctrica, don<strong>de</strong> se<br />
coloca un segundo electrodo llamado electrodo <strong>de</strong> referencia,<br />
que ha <strong>de</strong> ub icarse lejos <strong>de</strong>l <strong>de</strong> r egistro; no <strong>de</strong>b e estar<br />
en un sitio en el q ue ocurran cambios <strong>de</strong> voltaje durante el<br />
procedimiento experimental porque esto interferiría con la<br />
medición. El electrodo <strong>de</strong> referencia también pue<strong>de</strong> conectarse<br />
a tierra para disminuir las interferencias. El cambio <strong>de</strong><br />
voltaje se mi<strong>de</strong> entre dos electrodos colocados sobre el órgano<br />
o tejido <strong>de</strong> interés en el registro bipolar. En tal caso se usa<br />
un tercer electrodo para conectar al sujeto o tejido a tierra y<br />
reducir las interferencias.<br />
En términos generales, un elec trodo <strong>de</strong> registro y uno<br />
<strong>de</strong> estimulación son iguales; lo que difiere es el equipo al que<br />
se conectan: el elec trodo <strong>de</strong> estim ulación se conecta a un<br />
estimulador y el <strong>de</strong> r egistro a un sist ema <strong>de</strong> registro. Otra<br />
diferencia en el uso <strong>de</strong> estos dos tipos <strong>de</strong> electrodos consiste<br />
en que con los electrodos <strong>de</strong> registro se recomienda utilizar<br />
gel o pasta conductora para favorecer el paso <strong>de</strong> la corriente<br />
eléctrica hacia el electrodo; éste no es necesario con los electrodos<br />
<strong>de</strong> estimulación. En la figura 10.3 se muestra un ejemplo<br />
<strong>de</strong> electrodos <strong>de</strong> registro y <strong>de</strong> estimulación; nótese que el<br />
tipo <strong>de</strong> conector es distinto en los dos elec trodos porque se<br />
conectan a equipos diferentes.