Dokument 2.pdf - OPUS-Datenbank - Universität Hohenheim

5 Ergebnisse
vorherigen Experiment (0,5 g/l Butanol) PedR1 enthielt, war auch in diesem Experiment
reguliert (Spot: 3087). PedR1 wurde darin jedoch nur mit einem Peptid identifiziert
und erfüllte somit nicht die vorgegebenen Kriterien für eine Identifizierung.
Anstelle von PedR1 wurde in diesem Spot PP_3547 identifiziert. Spots, welche im
vorherigen Experiment PedE enthielten, waren in diesem Experiment nicht reguliert.
Wie Tabelle 5.6 zeigt, korreliert die Erhöhung der Butanolkonzentration nicht mit der
verstärkten Induktion der am Butanol-Katabolismus beteiligten Enzyme. Vielmehr ist
unter der höheren Butanolkonzentration eine weniger starke Induktion der entsprechenden
Enzyme zu beobachten. Zusätzlich zur 3-Hydroxybutyryl-CoA Dehydrogenase
(PP_3755) zeigte sich unter 3 g/l Butanol eine Induktion von FadB, welches die
gleiche Reaktion katalysiert. Neben PedI wurde eine weitere Aldehyd-Dehydrogenase
(PP_5278), die in keinem der bisherigen Experimente gefunden worden war, identifiziert.
Auffallend ist auch die Induktion verschiedener mit Stress assoziierter Proteine. Neben
dem Universal Stress Protein (PP_2132), sind auch zwei am Abbau von H 2 O 2 beteiligte
Enzyme (PP_0115, PP_2439) sowie die Chaperone (PP_3095, PP_4179) unter
Butanol deutlich induziert. Auch die beiden Citratzyklus-Enzyme Fumarate-Hydratase
(PP_1755) und Succinyl-CoA-Synthetase (PP_4186) wurden nach Butanol-Gabe verstärkt
exprimiert.
Differenzielle Regulation von Proteinen in Pseudomonas putida KT2440 nach
Behandlung mit 0,5 g/l bzw. 3 g/l Butanol
Der direkte Vergleich der beiden mit Butanol behandelten Proben zeigte insgesamt 20
regulierte Spots, wovon 18 in der massenspektrometrischen Analyse identifiziert werden
konnten. Zehn dieser Spots wiesen in mit 3 g/l Butanol behandelten Zellen ein größeres
Spotvolumen auf, als in Zellen, welche mit 0,5 g/l Butanol behandelt worden waren.
Darunter FadB (PP_2136) und die beiden Stressproteine PP_3668 und KatE. Zudem
waren die hypothetischen Proteine PP_3088 und PP_3099, welche Homologien zu
Typ VI-Sekretionssystemen aufweisen, bei einer Butanolkonzentration von 3 g/l stärker
exprimiert.
Die Enzyme Isocitrat-Lyase (AceA), Aldehyd Dehydrogenase (PedI), Alkohol-Dehydrogenase
(PedE) und 3-Hydroxybutyryl-CoA Dehydrogenase (PP_3755) waren jedoch in
mit 3 g/l Butanol behandelten Zellen schwächer induziert als in Zellen, welche mit
0,5 g/l Butanol behandelt worden waren. Generell bestätigte dieser direkte Vergleich
der beiden Butanolkonzentrationen die bereits aus den Vergleichen mit Glucose gewonnenen
Erkenntnisse.
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