Dokument 2.pdf - OPUS-Datenbank - Universität Hohenheim

6 Diskussion
in P. putida JM37 deutet zudem die Induktion der Enzyme Hydroxypyruvat-Isomerase
(PP_4298), Hydroxypyruvat-Reductase (PP_4300) und der Pyruvat-Kinase (PP_4301)
hin. Wie Li et al. (2010) zeigten, waren alle Mutanten von P. putida JM37 nach Inaktivierung
von gcl (∆gcl, ∆gcl/∆aceA, ∆gcl/ ∆glcB), zum Wachstum auf Glyoxylat
fähig. Dies würde einen weiteren Abbauweg für Glyoxylsäure in P. putida JM37, welcher
ebenfalls Wachstum auf diesem Substrat erlaubt, vermuten lassen. Unsere Experimente
lieferten jedoch keinen Hinweis auf die Existenz eines solchen alternativen Abbauweges.
Bei den beiden unter Ethylenglycol induzierten Alkohol-Dehydrogenasen PedE (PP_
2674) und PedH (PP_2679) handelt es sich um Pyrrolochinolinchinon-abhängige, periplasmatische
Enzyme, welche untereinander eine Aminosäure-Sequenzidentität von
52% aufweisen. Zudem zeigen sie ein hohes Maß an Sequenzidentität zu den in P. putida
U identifizierten Alkohol-Dehydrogenasen PedE und PedH (98%, 99%), welche dort
am Abbau von 2-Phenylethanol beteiligt sind (Arias et al., 2008) (Tabelle 6.1). Arias et
al. (2008) zeigten, dass das Wachstum einer ∆pedE::Tn5 Mutante auf C 6 -C 9 Alkoholen
sowie Phenylethanol deutlich verlangsamt war und die maximal erreichte OD 600 geringer
als diejenige des Wildtyps ausfiel. Unter Ethanol und Butanol zeigte die Mutante
hingegen ein deutlich schnelleres Wachstum und erreichte zudem eine höhere maximale
OD 600 . Auf den Abbau von Decanol hatte die Mutation keinen Einfluss. Die Doppelmutante
∆pedE::Tn5, ∆pedH ::pJQ200KS konnte auf den oben genannten Substanzen
nicht wachsen. Arias et al. (2008) schlossen daraus, dass der Abbau von Alkoholen,
welche eine Kettenlänge von weniger als sechs C-Atomen aufweisen nicht über PedE
und PedH verläuft. Aufgrund dieser Daten postulierten sie des Weiteren eine Präferenz
von PedH für Decanol (Arias et al., 2008). Ob PedE und PedH auch am Metbolismus
von Diolen beteiligt sind, wurde nicht untersucht.
202