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Dokument 2.pdf - OPUS-Datenbank - Universität Hohenheim

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5 Ergebnisse<br />

Locus-Tag Gen Protein Reg.<br />

Reg.<br />

Reg.<br />

Reg.<br />

1D<br />

Mem<br />

2D<br />

In<br />

PP_4011 icd isocitrate dehydrogenase,<br />

NADP-dependent<br />

5,7 - 3,6 Van<br />

PP_4116 aceA isocitrate lyase 5,2 9,5 3,3 Van<br />

PP_4185 sucD succinyl-CoA synthetase subunit<br />

alpha<br />

- 3 Glu<br />

PP_4186 sucC succinyl-CoA synthetase subunit beta - 2,5 Glu<br />

PP_4189 sucA 2-oxoglutarate dehydrogenase E1<br />

component<br />

PP_4190 sdhB succinate dehydrogenase iron-sulfur<br />

subunit<br />

PP_4191 sdhA succinate dehydrogenase flavoprotein<br />

subunit<br />

PP_4192 sdhD succinate dehydrogenase,<br />

hydrophobic membrane anchor<br />

protein<br />

PP_4193 sdhC succinate dehydrogenase, cytochrome<br />

b556 subunit<br />

- - -<br />

- 2,2 - Van<br />

2,1 - 1,9 Van<br />

- 2,9 - Van<br />

- 3,2 - Van<br />

-: Nicht identifiziert / reguliert.<br />

Reg. 1D: Regulationsfaktoren aus dem GeLCMSMS Experiment.<br />

Reg. Mem: Regulationsfaktoren aus der Analyse der Membranfraktion.<br />

Reg. 2D: Regulationsfaktoren aus der 2D-DIGE-Analyse.<br />

Reg. In: Zustand, in welchem das Protein induziert war.<br />

Vanillin-Abbau und der β-Ketoadipat-Weg<br />

In Gegenwart von Vanillin war vor allem eine verstärkte Expression der Enzyme des<br />

Protocatechuat-Zweiges des β-Ketoadipat-Wegs zu beobachten. Bis auf PcaG, welches<br />

mit keiner der verwendeten Methoden identifiziert werden konnte, waren alle Proteine<br />

des Pca-Zweiges unter Vanillin induziert (Abbildung 5.27).<br />

Downstream von Vanillinsäure waren die beiden Untereinheiten der Vanillat-Demethylase<br />

(VanA und VanB), welche die Umsetzung von Vanillinsäure zu Protocatechuat<br />

katalysieren, induziert. Das Enzym Vanillin-Dehydrogenase (Vdh), welches mutmaßlich<br />

den ersten Schritt des Vanillinabbaus katalysiert, wurde in diesen Experimenten<br />

(GeLCMSMS) zwar identifiziert, zeigte jedoch keine Regulation. Die von Overhage<br />

et al. (1999b) als VDH-II beschriebene Coniferylaldehyd-Dehydrogenase (PP_5120)<br />

war hingegen unter Vanillin 6,9-fach induziert. Da in diesem Versuch keine absoluten<br />

Enzymmengen und auch keine Umsatzraten bestimmt wurden, lässt dieses Ergebnis<br />

jedoch noch keinen Schluss über den ersten Schritt des Vanillinabbaus in P. putida<br />

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