Dokument 2.pdf - OPUS-Datenbank - Universität Hohenheim

3.3 Massenspektrometrie und quantitative Proteomanalyse
Abbildung 3.10: Vereinfacht dargestellter Ablauf eines 2D-DIGE-Experiments.
Nach dem Mischen des internen Standards und der Markierung der Proben werden die Proteine
auf einen IPG-Streifen geladen und nach ihrem isoelektrischen Punkt getrennt. In der zweiten
Dimension erfolgt dann eine Trennung nach dem Molekulargewicht der Proteine über eine SDS-
PAGE. Durch Anregung der einzelnen Farbstoffe in einem Fluoreszenzscanner werden für die
beiden Proben und den internen Standard individuelle Gelbilder erzeugt. Diese Bilder werden
nach erfolgter Normalisierung auf den internen Standard mittels einer Software verglichen und
die Unterschiede zwischen den analysierten Proben quantitativ erfasst.
31