Dokument 2.pdf - OPUS-Datenbank - Universität Hohenheim
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5 Ergebnisse<br />
sion verstärkt. So konnte für jeden Schritt der β-Oxidation ein oder mehrere Enzyme<br />
identifiziert werden (Abbildung 5.35).<br />
Da das Genprodukt von atuH nicht identifiziert werden konnte, stellt sich die Frage,<br />
ob die Aktivierung von Citronellsäure zu Citronellyl-CoA durch ein spezifisches<br />
Enzym oder durch unspezifische Acyl-CoA Synthetasen/Ligasen ermöglicht wird. Die<br />
Suche nach geeigneten Enzymen ergab sieben Kandidaten, welche eine entsprechende<br />
Protein-Domäne aufwiesen und unter Citronellol induziert waren (Tabelle 5.40). Zusätzlich<br />
wurden mehrere Acetyl-CoA-Synthetasen identifiziert, deren Induktion jedoch<br />
höchstwahrscheinlich auf die Freisetzung von Acetat durch das Enzym HHG-CoA-Lyase<br />
(AtuA) und der anschließenden Aktivierung des Acetats zu Acetyl-CoA zurückzuführen<br />
ist.<br />
Tabelle 5.40: Differentiell regulierte Acyl- und Acetyl-CoA Synthetasen in auf Citronellol<br />
kultivierten Zellen.<br />
Funktion Locus-Tag Gen Protein Reg.<br />
PA1617 probable AMP-binding enzyme 38,9<br />
PA2555 probable AMP-binding enzyme 7,2<br />
PA2557 probable AMP-binding enzyme 49,7<br />
Vermutete Acyl-CoA<br />
Synthetasen<br />
PA3299 fadD1 long-chain-fatty-acid–CoA ligase 5,6<br />
PA3300 fadD2 long-chain-fatty-acid–CoA ligase 6,1<br />
PA3860 probable AMP-binding enzyme 21<br />
PA3924<br />
probable medium-chain<br />
acyl-CoA ligase<br />
3,1<br />
PA0887 acsA acetyl-coenzyme A synthetase 3,4<br />
PA1997 probable AMP-binding enzyme 5,6<br />
Vermutete Acetyl-CoA<br />
Synthetasen<br />
PA2001 atoB acetyl-CoA acetyltransferase 21,6<br />
PA4026 probable acetyltransferase 5,3<br />
PA4733 acsB acetyl-coenzyme A synthetase 6,8<br />
Reg.: Werte >1 zeigen eine Induktion unter Citronellol im Vergleich zu Glucose an.<br />
Von den in Tabelle 5.40 aufgeführten Acyl-CoA Synthetasen zeigten PA1617 und PA<br />
2557 die stärkste Induktion unter Citronellol. PA2557 liegt zudem in einer unter Citronellol<br />
stark induzierten Genregion. So wurden die Proteine des Operons PA2552 -<br />
PA2555, welche größtenteils für Enzyme der β-Oxidation kodieren, unter Citronellol<br />
verstärkt exprimiert. Eine von Nadine Walter (Walter, 2012) durchgeführte heterologe<br />
Expression der Gene PA1617, PA2557 und PA4733 (AcsB) in E. coli und die anschlie-<br />
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