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I SIMPOSIO IBEROAMERICANO DE ECOLOGÍA REPRODUCTIVA, RECLUTAMIENTO Y PESQUERÍAS
Bacalao.-Muestra una gran afinidad por la mayoría de los tintes utilizados, pero de forma
específica se tiñen diferencialmente estructuras que evidencian actividad de puesta. Así, se
consigue ver claramente diferenciados los FPO y atresias, tanto con Metanil yelow (Fig. 1a),
donde se tiñen de rosa por el efecto PAS (flecha), como con VOF (Fig. 1b) donde se tiñen de
azul (flecha).
Como control, se utilizaron los mismos protocolos con muestras inmaduras y no se
observaron estructuras similares (Fig. 1c).
Gallo y Merluza.-En el caso de los ovarios de gallo (Fig. 1d) y merluza (Fig. 1e) los
resultados no fueron tan evidentes, en las muestras procesadas con los diferentes protocolos se
ha observado que el tejido reaccionaba mejor con el Tricrómico de Masson, pero las
estructuras de interés apenas se teñían específicamente y tan sólo ligeramente mejor que
cuando se tiñeron con HE (Fig. 1e, panel superior).
Separación entre FPO y atresias (alfa y beta), especialmente en estado avanzado de
degeneración, mediante el uso de fluorescencia como un método para una rápida
identificación de las principales estructuras de ovario.
Merluza.-Teñida con Metanil Yelow (Fig. 1f), la β-atresia (flecha amarilla) y FPO (flecha
azul) son claramente distinguibles usando fluorescencia con el filtro G- 2 A (Fig. 1g), ya que
en ovocitos atrésicos aparecen restos de vitelo visibles con la fluorescencia. Por el contrario,
es difícil discriminar estas estructuras en campo claro con otras tinciones probadas.
Bacalao y Gallo.-Teñidas con VOF (Fig. 1h), ambas estructuras, FPO y atresia (flechas), son
visibles aunque difícilmente diferenciables dado el estado de degeneración avanzada que
presentan, por lo que requiere desarrollar más la técnica para diferenciarlas con precisión.
Curiosamente estas estructuras se muestran menos evidentes cuando se utiliza el filtro B-2A
(Fig. 1i).
Conclusiones
Este estudio demuestra:
La eficacia de las tinciones utilizadas en la diferenciación de hembras inmaduras y en reposo
a través del reconocimiento de estructuras “residuales” mediante diferentes técnicas de
tinción.
El uso de fluorescencia nos ayuda a ver los restos de folículos atrésicos, tanto el corion como
el vitelo, los cuales son altamente fluorescentes. Sin embargo, los FPO nunca son visibles
bajo luz fluorescente. Por lo tanto es una buena técnica para la discriminación de atresia y
FPO.
El diagnóstico en ambos casos varía en función del tejido, época del año, técnica de tinción
utilizada y filtros (fluorescencia). Sería necesario por lo tanto una mejora de los protocolos y
un estudio más especifico orientado a cada especie para hacer su uso extensible al mayor
número de especies posibles.
Referencias
De Rossi, A., Rocha, L. B. and Rossi, M. A. 2007. Application of fluorescence microscopy on
hematoxylin and eosin-stained sections of healthy and diseased teeth and supporting
structures. Journal of Oral Pathology Medicine 36: 377-381.
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Sesión 1: Estrategias reproductivas de organismos
acuáticos. Ecofisiología reproductiva