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Inkubation 30 min bei 20°C Bestätigungs- reaktionen 3 Material und Methoden 5 g Fisch + 45 ml Peptonlösung Abbildung 10: Fließschema für die Bestimmung von Aeromonas hydrophila 70 1.Tupferpaar-Probe + 10 ml Peptonlösung Erstellen der Dezimalverdünnungsstufen Spatelverfahren: 0,1 ml der (Ausgangslösung), Erst- und Zweitverdünnung auf Ryan-Agar ausspateln bebrüten bei 30°C und 48h auf: Subkultivierung von typisch aussehenden Kolonien auf Columbia-Blut-Agar Oxidase Gramfärbung 20NE Bebrütung bei 30°C für 24h
3 Material und Methoden 3.2.5 Erregerdifferenzierung und –identifizierung 3.2.5.1 Makroskopische Identifizierung Von den Selektivnährböden der jeweiligen Keimspezies wurden bis zu 5 typisch aussehende Einzelkolonien mit einer Platinöse abgenommen, im „Drei-Ösen- Ausstrich“ auf einen Columbia-Blut-Agar (Oxoid) subkultiviert und anschließend entsprechend der Keimart bebrütet (bei 30°C oder bei 37°C). Nach 24h wurde in der Reinkultur der Kolonien das für die jeweilige Keimart typische Kolonieaussehen sowie - sofern typisch für die jeweilige Keimgruppe - die ausgebildete Hämolysezone bewertet. 3.2.5.2 Gramfärbung und mikroskopische Identifizierung Die Gramfärbung wurde folgendermaßen durchgeführt: Nach Einreiben einer oder mehrerer Kolonien in einen Tropfen physiologischer 0,9 % Kochsalzlösung und Auftragen auf den Objektträger, wurde der Ausstrich luftgetrocknet und hitzefixiert. Für die Gramfärbung wurden maximal 24h alte Kulturen verwendet, da sich das Färbeverhalten bei Alterung der Zellen verändern kann (BAUMGART 2006). Das fixierte Präparat wurde zuerst 3 Minuten mit Karbolgentianaviolett (Kristallviolett), anschließend für weitere 3 Minuten mit der Lugol-Lösung gefärbt. Das Präparat wurde mit Ethanol sowie mit Wasser abgespült und mit der Karbolfuchsinlösung (Safranin) für 30 Sekunden gegen gefärbt und nochmals mit Wasser gespült. Die mikroskopische Beurteilung erfolgte mit einem Lichtmikroskop bei 10x10 facher Vergrößerung und unter Zuhilfenahme einer Ölimmersion. Kriterien für die Beurteilung der einzelnen Bakterienstämme waren die Art der Gramfärbung, die typische Gestalt, (die Größe) und die charakteristische Anordnung der Bakterien zueinander. 71
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Bibliografische Informationen der D
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Wissenschaftliche Betreuung: Apl. P
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Inhaltsverzeichnis 1 Einleitung ...
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3.2.6.1 Berechnung der Keimzahlen v
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Abkürzungsverzeichnis ABl Amtsblat
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1 Einleitung 1 Einleitung und Frage
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2 Literaturübersicht 2.1 Rechtlich
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Seite 79 und 80: 3 Material und Methoden Aerobe Gesa
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Seite 83: Inkubation 30 min bei 20°C Typisch
Seite 87 und 88: 3.2.5.6 CAMP - Test 3 Material und
Seite 89 und 90: 3.2.6 Berechnung der Keimzahlen 3 M
Seite 91 und 92: 3 Material und Methoden Sind keine
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Seite 103 und 104: 4 Ergebnisse Tabelle 5: Anzahl der
Seite 105 und 106: 4 Ergebnisse Kolmogorov-Smirnov-Tes
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Seite 109 und 110: 4 Ergebnisse Die höchsten Keimzahl
Seite 111 und 112: 4 Ergebnisse 4.3.3 Vergleich der zu
Seite 113 und 114: 4 Ergebnisse Bei allen anderen mikr
Seite 115 und 116: 4 Ergebnisse Tabelle 15: Chi² - Te
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Probenart Schlachtung- Messer 4 Erg
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4 Ergebnisse Gruppe1: Hygiene-Kateg
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Betrieb Gruppe 1 KbE/cm² 4 Ergebni
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5 Diskussion 5 Diskussion 5.1 Auswa
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5 Diskussion Da Betriebe beprobt wu
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5 Diskussion der Süßwasserfische
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5 Diskussion Listerien sind in Lebe
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5 Diskussion beispielsweise in Betr
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5 Diskussion Verdünnungslösung au
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5 Diskussion höherer Keimkonzentra
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5 Diskussion den Erfolg der Reinigu
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5 Diskussion Des Weiteren können m
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5 Diskussion So untersuchten JÖCKE
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5 Diskussion Durch das hierfür ver
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5 Diskussion argumentierten hier mi
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6 Zusammenfassung 6 Zusammenfassung
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6 Zusammenfassung Zur objektivierte
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7 Summary In comparison of the test
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8 Literaturverzeichnis 8 Literaturv
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BERG, C. (2006) 8 Literaturverzeich
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8 Literaturverzeichnis Amtliche Sam
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EG 2004/379 (2004) 8 Literaturverze
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9 Anhang 9 Anhang 9.1 Transport- un
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9 Anhang Zu Lezithin tropfenweise T
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9 Anhang • 1,35 g Kaliumdihydroge
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9 Anhang Der Nährboden ist klar un
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Plate-Count-Agar (Heipha, Eppelheim
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9 Anhang Bactident ® - Katalase Wa
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9 Anhang Dispenser-Diluter (Medipro
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Ansprechpartner für die amtliche L
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Eigene Fahrzeuge (PKW/LKW) Speditio
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9 Anhang Räucherfische o Ja Heißr
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9.5 Probenentnahmeprotokoll (Aquaku
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9 Anhang Abbildung 14: Häufigkeit
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9 Anhang Tabelle 20: Regressionsana
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10 Danksagung 215 9 Anhang Mein ers
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