Untitled - Stiftung Tierärztliche Hochschule Hannover

3.2.5.3 Katalase – Test
3 Material und Methoden
Zum Erregermaterial des zu untersuchenden Bakterienisolats, welches nicht älter als
24h war, wurde ein Tropfen 3 %iges H2O2 (Bactident ® - Katalase, Merck) auf einem
Objektträger hinzugegeben.
Die Auswertung der Reaktion erfolgte nach Herstellerangaben.
3.2.5.4 Koagulase – Test
Zur Bestätigung von koagulase-positiven Staphylokokken wurde der Koagulase-Test
(Bactident ® - Koagulase, Merck) verwendet.
In ein Röhrchen mit Hirn-Herz-Bouillon wurde von jeder ausgewählten Kolonie eine
Impfkultur übertragen und für 24h bei 35°C bis 37°C bebrütet.
Jeder Kultur wurden unter sterilen Bedingungen 0,1 ml entnommen und in sterile
Hämolyseröhrchen, die 0,3 ml Kaninchenplasma enthielten, übertragen und bei
35°C bis 37°C bebrütet.
Die Koagulation des Plasmas wurde nach 4h bis 6h und im negativen Fall nach
weiteren 24h Bebrütung durch Kippen des Röhrchens überprüft.
Der Koagulase-Test (die Umwandlung von Fibrinogen zu Fibrin durch die
vorhandene Koagulase) wurde als positiv bewertet, wenn das Volumen des
Koagulats mehr als die Hälfte des Ausgangsvolumens der Flüssigkeit einnahm.
3.2.5.5 Oxidase – Test
Zum Nachweis der Cytochromoxidase wurde die zu prüfende Kultur auf einen
speziellen kommerziell erhältlichen Oxidaseteststreifen (Bactident ® - Oxidase, Merck)
aufgetragen, der künstliche Substrate enthielt und anstelle natürlicher
Elektronenakzeptoren die Reduktion der Cytochromoxidase bewirkten.
Die Auswertung der Reaktion erfolgte nach Herstellerangaben.
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