Dokument 1.pdf - OPUS - Friedrich-Alexander-Universität Erlangen ...

Weitere Magazine

Empfehlungen

Info

I. 4. Material und Methoden gespleißter Fragmente durch Agarose-Geleelektrophorese erschweren, weshalb diese Stragtegie gewählt wurde. Die Amplifikation genomischer Fragmente aufgrund von verunreinigten Reagenzien wurde außerdem durch Kontrollreaktionen ausge- schlossen (Reaktionsansätze ohne Reverse Transkriptase, bzw. ohne RNA Matrit- ze). Tab. 5: Primer und Bedingungen der RT-PCR Primer Annealing- Zyklen Fragment- nanos temperaturlänge fw 5’-ACGTGCTCAAATGTCTTTC-3’ bw 5’-GTGGTTGATAAATTTGGTCG-3’ 50 °C 34 450 bp rp49 Verändert nach (Konopova und Jindra, 2007) fw 5’-ATGGCAAACTCAAACGCAAC-3’ bw 5’-TAGCATGTGCTTCGTTTTGG-3’ 50 °C 24 132 bp 4.3. RNAi-Experimente 128 RNAi Injektionen von Tribolium Puppen, ebenso wie embryonale, larvale und a- dulte RNAi-Experimente wurden im Wesentlichen wie beschrieben durchgeführt (Bucher et al., 2002; Brown et al., 1999b; Tomoyasu und Denell, 2004; van der Zee et al., 2006). Die hier gezeigten Ergebnisse stammen, falls nicht anders ausgewie- sen, aus pupalen RNAi-Experimenten. Für die Synthese der Kontroll-RNA gegen DS-Red wurde eine DNA-Matrize durch PCR hergestellt. Hierzu wurden genspezifische Primer mit zusätzlichen T7- RNA-Polymerase Promoter-Sequenzen verwendet. Das DS-Red Fragment wurde von pSLfa[Tc’hsp5’-dsRedEx-3’UTR] (Johannes Schinko, Göttingen) amplifiziert. Auch von nanos und pumilio wurden DNA-Matrizen durch PCR, unter Verwendung des T7-Primers und eines T3-Primers ebenfalls mit zusätzlicher T7- Promotorsequenz, hergestellt. Aufgereinigte PCR Produkte (MinElute PCR Purificati- on, Quiagen) wurden zu RNA-Synthese mit MEGAscript T7 Kits (Ambion) verwendet. dsRNAs wurden in Injektionspuffer (1,4 mM NaCl, 0,07 mM Na2HPO4, 0,03 mM KH2PO4, 4 mM KCL) gelöst.
Tab. 6: Primer für dsRNA Matrize I. 4. Material und Methoden Primer DSred Annealing-temperatur fw 5’-TAATACGACTCACTATAGG AGTTCATGCGCTTCAAGGTG-3’ bw 5’-TAATACGACTCACTATAGG TGGTGTAGTCCTCGTTGTGG-3’ 5 Zyklen 40 °C, 30 Zyklen 58 °C T7 5’-TAATACGACTCACTATAGG-3’ T3-T7 5’-TAATACGACTCACTATAGG AATTAACCCTCACTAAAGGG-3’ Tab. 7: Verwendete dsRNA 58 °C Gen Verwendete Konzentration Fragmentlänge DSred 8 !g/!l 600 bp nanos 4 !g/!l 810 bp pumilio 4 !g/!l 887 bp brain-tumor 1 !g/!l 713 bp Für nanos/pumilio Doppel-RNAi wurden ebenfalls 4 !g/!l jeder RNA eingesetzt. Die beobachteten Phänotypen traten auch nach Injektion niedriger Konzentrationen auf (1 – 3 !g/l) der höchstmögliche Anteil starker Phänotypen wurde allerdings durch die angegebenen Konzentrationen erreicht. 129
Seite 1 und 2:
Die Funktion von Genen der posterio
Seite 3:
Danke! Obwohl als letztes verfasst,
Seite 6 und 7:
Inhaltsverzeichnis 2.4.1. Die Segme
Seite 8 und 9:
Inhaltsverzeichnis 3.1.2. Die Auswe
Seite 10 und 11:
Summary 2 Thus, I could show that a
Seite 12 und 13:
Zusammenfassung praktischen Durchf
Seite 14 und 15:
Abbildungsverzeichnis Abb. 24: Sche
Seite 16 und 17:
Abkürzungen Abkürzungen 8 AS: Ami
Seite 19 und 20:
Allgemeine Einleitung Allgemeine Ei
Seite 21 und 22:
Allgemeine Einleitung Tiere, hervor
Seite 23 und 24:
I. Kapitel: I. 1. Einleitung Die Fu
Seite 25 und 26:
I. 1. Einleitung 3; Davis und Patel
Seite 27 und 28:
I. 1. Einleitung 1.2. Drosophila me
Seite 29 und 30:
I. 1. Einleitung Butler, 1988). Int
Seite 31 und 32:
I. 1. Einleitung zur Phosphorylieru
Seite 33 und 34:
I. 1. Einleitung Gene ist in Tribol
Seite 35 und 36:
I. 1. Einleitung Die frühe Regulat
Seite 37 und 38:
I. 1. Einleitung wahrscheinlich üb
Seite 39 und 40:
I. 1. Einleitung wie in Vertebraten
Seite 41 und 42:
I. 1. Einleitung und Wharton, 1999)
Seite 43 und 44:
I. 1. Einleitung des nanos-Verlusts
Seite 45 und 46:
I. 1. Einleitung Außerdem zeigen n
Seite 47 und 48:
1.5. Ziele des ersten Kapitels der
Seite 49 und 50:
2. Ergebnisse I. 2. Ergebnisse 2.1.
Seite 51 und 52:
I. 2. Ergebnisse Abb. 6: Sequenzver
Seite 53 und 54:
I. 2. Ergebnisse Domäne vermittelt
Seite 55 und 56:
2.2.2. nanos-Expression ist nur in
Seite 57 und 58:
I. 2. Ergebnisse 2.3. pRNAi für na
Seite 59 und 60:
I. 2. Ergebnisse einerseits, dass d
Seite 61 und 62:
I. 2. Ergebnisse des Kopfes. Außer
Seite 63 und 64:
I. 2. Ergebnisse Doppel-RNAi in ver
Seite 65 und 66:
I. 2. Ergebnisse 2.4. Frühembryona
Seite 67 und 68:
I. 2. Ergebnisse nächst ist zu beo
Seite 69 und 70:
I. 2. Ergebnisse 61
Seite 71 und 72:
I. 2. Ergebnisse Domäne. Diese ble
Seite 73 und 74:
I. 2. Ergebnisse 65
Seite 75 und 76:
I. 2. Ergebnisse terminaler Zielgen
Seite 77 und 78:
I. 2. Ergebnisse Tatsächlich fehle
Seite 79 und 80:
I. 2. Ergebnisse Abb. 15: nos/pum-R
Seite 81 und 82:
I. 2. Ergebnisse Expression auf die
Seite 83 und 84:
I. 2. Ergebnisse 2.7. Die Beteiligu
Seite 85 und 86: 2.7.1. Tribolium brain-tumor I. 2.
Seite 87 und 88: I. 2. Ergebnisse 2.7.3. brat-RNAi f
Seite 89 und 90: I. 2. Ergebnisse kulas somit interm
Seite 91 und 92: Abb. 19: brain-tumor-RNAi führt zu
Seite 93 und 94: I. 2. Ergebnisse Keimbahn in Verbin
Seite 95 und 96: I. 2. Ergebnisse 2.8.3. pumilio spi
Seite 97 und 98: I. 2. Ergebnisse Präpuppe, deren M
Seite 99 und 100: 3. Diskussion I. 3. Diskussion 3.1.
Seite 101 und 102: I. 3. Diskussion mann, 1998; Asaoka
Seite 103 und 104: I. 3. Diskussion leider nicht gepr
Seite 105 und 106: I. 3. Diskussion Möglicherweise ve
Seite 107 und 108: I. 3. Diskussion Marques-Souza et a
Seite 109 und 110: I. 3. Diskussion der antennalen Seg
Seite 111 und 112: I. 3. Diskussion Effekt, der erst i
Seite 113 und 114: I. 3. Diskussion Netzwerk, das zur
Seite 115 und 116: I. 3. Diskussion gerufene Vernetzun
Seite 117 und 118: I. 3. Diskussion Natürlich gibt es
Seite 119 und 120: I. 3. Diskussion 3.4. Das Zusammens
Seite 121 und 122: I. 3. Diskussion sion als Substrat
Seite 123 und 124: I. 3. Diskussion ren gt-Domäne üb
Seite 125 und 126: I. 3. Diskussion Außerdem hat otd-
Seite 127 und 128: I. 3. Diskussion on eines von Fakto
Seite 129 und 130: I. 3. Diskussion jeweiligen ersten
Seite 131 und 132: 4. Material und Methoden I. 4. Mate
Seite 133 und 134: 4.2.1. in situ Hybridisierung I. 4.
Seite 135: I. 4. Material und Methoden ohne Bl
Seite 140 und 141: II. 1. Einleitung 132 In Anlehnung
Seite 142 und 143: II. 1. Einleitung Entwicklung. Dabe
Seite 144 und 145: II. 1. Einleitung 1.3. RNAi-Screens
Seite 146 und 147: II. 1. Einleitung Serie zu beobacht
Seite 148 und 149: II. 1. Einleitung 140 schen Fragest
Seite 150 und 151: II. 1. Einleitung Augen und im zent
Seite 152 und 153: II. 1. Einleitung 1.4.3. Die iBeetl
Seite 154 und 155: II. 1. Einleitung sophila wegen tec
Seite 156 und 157: II. 1. Einleitung 1.5. Ziele des zw
Seite 158 und 159: II. 2. Ergebnisse nale Musterbildun
Seite 160 und 161: II. 2. Ergebnisse 152 Im nächsten
Seite 162 und 163: II. 2. Ergebnisse bei 30°C inkubie
Seite 164 und 165: II. 2. Ergebnisse 1999a) 156 Auch d
Seite 166 und 167: II. 2. Ergebnisse lichst effektiv z
Seite 168 und 169: II. 2. Ergebnisse 160
Seite 170 und 171: II. 2. Ergebnisse 162
Seite 172 und 173: II. 2. Ergebnisse Abb. 29: Arbeitsp
Seite 174 und 175: II. 2. Ergebnisse Ergebnisse der Po
Seite 176 und 177: II. 2. Ergebnisse von RNAi-Effekten
Seite 178 und 179: II. 2. Ergebnisse 2.3. Es konnten f
Seite 180 und 181: II. 2. Ergebnisse Abb. 32: Zusammen
Seite 182 und 183: II. 2. Ergebnisse Abb. 33: Defekte
Seite 184 und 185: II. 2. Ergebnisse zu trennen. So k
Seite 186 und 187:
II. 2. Ergebnisse 2.3.2. Defekte w
Seite 188 und 189:
II. 2. Ergebnisse Abb. 35: Morpholo
Seite 190 und 191:
II. 2. Ergebnisse diesen Phänotype
Seite 192 und 193:
II. 2. Ergebnisse 184
Seite 194 und 195:
II. 2. Ergebnisse Abb. 37: In adult
Seite 196 und 197:
II. 2. Ergebnisse Abb. 38: Bisher u
Seite 198 und 199:
II. 3. Diskussion des ersten Jahres
Seite 200 und 201:
II. 3. Diskussion analysiert werden
Seite 202 und 203:
II. 3. Diskussion Meinung, dass der
Seite 204 und 205:
II. 3. Diskussion jeweils zu Beginn
Seite 206 und 207:
II. 3. Diskussion nach den gleichen
Seite 208 und 209:
II. 3. Diskussion in Tribolium, nic
Seite 210 und 211:
II. 3. Diskussion 1980). Bei der Ka
Seite 212 und 213:
II. 3. Diskussion phänotypische Hi
Seite 214 und 215:
II. 3. Diskussion 3.2.6. iBeetle ha
Seite 216 und 217:
II. 3. Diskussion Prozesse der Inse
Seite 218 und 219:
II. 4. Material und Methoden Phenol
Seite 220 und 221:
II. 4. Material und Methoden pigmen
Seite 222 und 223:
II. 4. Material und Methoden 214 Em
Seite 224 und 225:
II. 4. Material und Methoden bei de
Seite 226 und 227:
II. 4. Material und Methoden 218 Ti
Seite 229 und 230:
Allgemeine Diskussion Allgemeine Di
Seite 231:
Allgemeine Diskussion und Achsendet
Seite 234 und 235:
Anhang ACCCATCCGTACGGCTGCCGGGTCATTC
Seite 236 und 237:
Anhang 2. Ergänzende Ergebnisse zu
Seite 238 und 239:
Anhang 3. Zeitaufwand der iBeetle-A
Seite 240 und 241:
Anhang 5. Zusammenfassung der Ergeb
Seite 242 und 243:
234 134 900 14 similar to D123 (cdc
Seite 244 und 245:
236 77 1500 57 gene without homolog
Seite 246 und 247:
238 43 1000 99 similar to Rab-prote
Seite 248 und 249:
Anhang gemischt embryonal letal von
Seite 250 und 251:
Literatur Literatur Abdel-Latief, M
Seite 252 und 253:
Literatur Bernstein, D., Hook, B.,
Seite 254 und 255:
Literatur Ciglar, L. und Furlong, E
Seite 256 und 257:
Literatur Falciani, F., Hausdorf, B
Seite 258 und 259:
Literatur Gutjahr, T., Vanario-Alon
Seite 260 und 261:
Literatur Kiger, A. A., Baum, B., J
Seite 262 und 263:
Literatur Lin, H. und Spradling, A.
Seite 264 und 265:
Literatur binding protein that phys
Seite 266 und 267:
Literatur Riddiford, L. M., Hiruma,
Seite 268 und 269:
Literatur Schüpbach, T. und Wiesch
Seite 270 und 271:
Literatur Tomoyasu, Y., Miller, S.
Seite 272:
Literatur Zhang, X. D. und Heyse, J
Alle anzeigen

Dokument 1.pdf - OPUS - Friedrich-Alexander-Universität Erlangen ...

Sie wollen auch ein ePaper? Erhöhen Sie die Reichweite Ihrer Titel.

Template löschen?

Als Template speichern?