Dokument 1.pdf - OPUS - Friedrich-Alexander-Universität Erlangen ...

I. 2. Ergebnisse
chenmäßig vergößert, und das Gewebe scheinbar massiv verändert, wobei vor allem
die regelmäßige Anordnung der Zellkerne (Abb. 19, G’) gestört ist. Sie bilden teilwei-
se Gruppen von zwei bis drei Kernen, was auf Störungen der Zellmorphologie hin-
weist. Zudem deuten möglich, dass durch Hoechst intensiver gefärbte Bereiche in
den Zellkernen auf apoptotische Prozesse hin. Innerhalb der Embryonalanlage ist
eve-Expression zwar nachweisbar, einzelne eve-Domänen sind allerdings nur
schwer zu erkennen. Die individuellen Streifen sind kaum voneinander abgegrenzt,
nahezu ohne räumlichen Abstand zueinander und in ihrer Form deutlich gestört. Das
Muster könnte dabei möglicherweise die Reste von zwei segmentalen Streifen,
gefolgt von einer posterioren Domäne zeigen (Abb. 19, F). Somit scheint die dritte
blastodermale eve-Domäne (Abb. 19, E „3“) zu fehlen. Angesichts eines solch dra-
matischen Phänotyps ist es denkbar, dass Embryonen mit dem vollständigen Funkti-
onsverlust schon vor Erreichen des Keimstreifs- oder Larvenstadiums sterben und
somit die stärksten Defekte zu diesen Zeitpunkten schon nicht mehr beobachtet
werden können. Die Anzahl an Embryonen ohne Kutikula war allerdings nicht deut-
lich erhöht, wahrscheinlich ist der Anteil dieser starken Phänotypen zu gering. Mög-
licherweis ließe sich die Effizienz der RNAi, und damit die Frequenz der starken
Defekte, durch eine Erhöhung der dsRNA Konzentration noch steigern.
80
Die hier gezeigten Ergebnisse machen unterschiedliche Effekte von brat-RNAi
deutlich und zeigen Diskrepanzen der phänotypischen Ausprägung zu unterschiedli-
chen Zeitpunkten der Embryogenese auf. Die Analyse der blastodermalen Stadien
erlaubte offenbar die Detektion der am stärksten ausgeprägen Defekte, die vermut-
lich zu früher embryonaler Letalität führen und somit zu späteren Zeitpunkten nicht
mehr feststellbar sind. Die untersuchten Keimstreifembryonen zeigen nur schwache
Defekte. Dies legt nahe, dass es sich hierbei um Embryonen handelt, die überlebten
weil der RNAi-Effekt schwächer ausgeprägt war. Auch die in den larvalen Kutikulas
auftretenden abdominalen Defekte sind in dieser Form nicht in den Keimstreifen
feststellbar. Es ist nun denkbar, dass brat in Tribolium sowohl eine frühe Funktion
hat, deren Ausfall in den stärksten Fällen zu frühembryonaler Letalität führt, als auch
eine davon unabhängige spätere Wirkung auf einen Teil der abdominalen Segmente
entfaltet, die nach RNAi in einem sekundären Prozess, der die initiale Segmentbil-
dung kaum betrifft, zum Verlust dieser Segmente führt. Es ist allerdings nicht auszu-
schließen, dass alle beobachteten Effekte nur unterschiedlich starke Ausprägungen
des RNAi-Effekts einer Funktion darstellen. In diesem Fall würden die larvalen Kuti-