Dokument 1.pdf - OPUS - Friedrich-Alexander-Universität Erlangen ...
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II. 2. Ergebnisse<br />
diesen Phänotypen könnte möglicherweise ein Zusammenhang bestehen: drei dieser<br />
vier RNAs scheinen zu essentiellen „house-keeping“-Genen zu korrespondieren. Die<br />
Recherche der besten Drosophila-BLAST-Ergebnisse in „Fly base“ ergab einen<br />
Kalium-Kanal (RNA-# 51), ein Protein mit einer Rolle für den Atmungsketten-<br />
Komplex IV (RNA-# 36) und einen Elektronentransporter der oxidativen Phosphory-<br />
lierung (RNA-# 88). Im vierten Fall gab es keine Information in „Fly base“. Außerdem<br />
führten mindestens drei der vier RNAs nach pupaler Injektion zu adulter Letalität oder<br />
Kachexie, im vierten Fall wurde dies fälschlicherweise nicht getestet. Diese Situation<br />
legt nun den Schluss nahe, dass hier möglicherweise dsRNAs Stoffwechsel-<br />
relevanter Gene im Falle einer wenig effizienten larvalen RNA-Interferenz oder durch<br />
teilweise Redundanz erst in späteren Stadien zum Tod der Tiere führen. Möglicher-<br />
weise akkumulieren durch die RNAi hervorgerufene Imbalancen, bis sie schließlich<br />
zum Tod der injizierten Tiere führen und somit den Eindruck eines spezifischen<br />
Defekts der Metamorphose erwecken. Diese Situation kann bei der Suche nach<br />
Kandidaten-Genen für die Metamorphose-Kontrolle durch die Berücksichtigung der<br />
Phänotypen nach pupaler Injektion entschärft werden, indem hierbei Kandidaten<br />
priorisiert werden, die nach pupaler RNAi nicht zu Letalität führen. Die RNAs # 36, 51<br />
und 64 führten nach pupaler Injektion zu adulter Letalität/Kachexie. Es zeigt sich also<br />
der große Wert der beiden unabhängigen Injektionen für die Analyse der Screen-<br />
Ergebnisse.<br />
182<br />
Im Laufe der Metamorphose traten auch Defekte einzelner morphogenetischer<br />
Prozesse auf. So kam es zu einigen Defekten der Flügelentwicklung, der Kopf- und<br />
der Beinentwicklung sowie zu Veränderungen der Stinkdrüsen und der Kutikula (Abb.<br />
36, Abb. 37). Hervorzuheben ist dabei die Pleiotropie von similar to Dynein light<br />
chain 90F (RNA-# 70) dessen larvale Injektion zu Veränderungen der Antennen<br />
(nicht zu erkennen in Abb. 36 D), der pupalen (Abb. 36 D) und der adulten Flügel (n.<br />
gezeigt) führt und das sich zudem sowohl nach larvaler als auch pupaler Injektion auf<br />
die Morphologie des Ovars auswirkt (Abb. 33, Abb. 34). Dieses Gen scheint also in<br />
diversen Prozessen eine wichtige Rolle zu spielen, ohne eine „house keeping“-<br />
Funktion zu erfüllen. Ähnlich scheint die Situation in Drosophila zu sein, wo diese<br />
Dynein-Untereinheit ebenfalls verzichtbar für die grundsätzlichen Funktionen von<br />
Dynein zu sein scheint, aber beispielsweise während der Spermatogenese wichtig ist<br />
(Li et al., 2004; Mische et al., 2008). Es ist also denkbar, dass similar to Dynein light