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I. 2. Ergebnisse
2.4.3. nanos und pumilio sind nötig für die Expression eines termina-
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len Zielgens
Im vorangegangenen Kapitel habe ich gezeigt, dass nanos und pumilio Einfluss
auf posteriore gap-Domänen und die posteriore Invagination des Keimrudiments
haben, und auf eine Ähnlichkeit zu Effekten nach RNAi gegen Komponenten des
torso-Signalwegs hingewiesen (Schoppmeier und Schröder, 2005). Ein Zusammen-
hang zwischen diesen Systemen und nanos/pumilio ist also denkbar. Um dies zu
überprüfen habe ich die Auswirkungen von nos/pum-RNAi auf die Expression eines
Zielgens des terminalen Systems, nämlich tailless, untersucht. In Drosophila wird die
Expression von tailless am posterioren Pol des Embryos durch die Aktivierung des
torso-Rezeptors ermöglicht (Furriols und Casanova, 2003). Auch im Tribolium-
Blastoderm wird tll am posterioren Pol exprimiert (Schröder et al., 2000). Kurz bevor
die Differenzierung des Blastoderms in Serosa- und Embryonalanlage anhand der
Kernmorphologie sichtbar wird, ist tll in einer Kappe am posterioren Ende des Emb-
ryos exprimiert. Eine anteriore Expressionsdomäne entsteht erst in der Kopfanlage
des differenzierten Blastoderms. Zu diesem Zeitpunkt existieren beide Domänen für
eine sehr kurze Zeit gleichzeitig, bis die bereits deutlich reduzierte posteriore Domä-
ne vollständig verschwindet. Die posteriore tll-Domäne ist also nur innerhalb eines
kurzen Zeitfensters vorhanden (Schröder et al., 2000). Während diese transiente
Expression sowohl in lateraler Ansicht, als auch in posteriorer Aufsicht eines Wildtyp
Embryos (Abb. 14, E, I) deutlich zu erkennen ist, fehlt sie nach nos/pum-RNAi nahe-
zu vollständig (Abb. 14, F, J). Die Verteilung der Zellkerne in Hoechst-Färbungen
(Abb. 14, G, H) zeigt, dass hier nur sich entsprechende Entwicklungsstadien mitein-
ander verglichen wurden. In beiden hier gezeigten Embryonen ist noch keine
Ungleichverteilung der Zellkerne zu erkennen, wobei beide die gleiche Zellkerndichte
aufweisen. Als Kontrolle wurde in diesem Experiment zusätzlich die Expression von
otd-1 nachgewiesen. otd-1 ist zu diesem Entwicklungsstadium in einer großen,
anterioren Domäne exprimiert, die nicht mit der posterioren tll-Expression überlappt
(Abb. 14, E, F). Das Vorhandensein der otd-1-Domäne schließt ein Fehlen der tll-
Expression aufgrund von RNA-Degradation wegen mangelnder Fixierung oder
anderer Probleme der Nachweismethode aus und dient als zusätzlicher Hinweis auf
das vergleichbare Entwicklungsalter der Embryonen.
nanos und pumilio sind also nötig für die Expression des terminalen Zielgens tll.
Somit eröffnet sich die Möglichkeit, dass nanos und pumilio über die Regulation