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II. 2. Ergebnisse
1999a)
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Auch die Larven werden in ein Multiwellsystem transferiert (Berghammer et al.,
Analyse der pupalen Morphologie und Verpaarung, Tag 11:
Die injizierten Tiere befinden sich jetzt im pupalen Stadium. Die Zahl der überle-
benden und toten Tiere wird dokumentiert. Eine hohe Zahl toter Larven weist entwe-
der auf eine allgemein wichtige Genfunktion oder möglicherweise auf einen Defekt
der Larvalhäutung hin, was aber nicht eindeutig unterscheidbar ist. Das Auftreten von
lebenden L7-Larven, größeren Larvenstadien oder kleineren Puppenstadien weist
auf eine Funktion in der Metamorphosekontrolle hin, ebenso wie das Vorhandensein
toter Präpuppen oder unvollständig verpuppter Tiere.
Die Morphologie der Puppen und das Enhancer-Trap-Muster im dritten Thorakal-
segment wird auf Defekte untersucht um Phänotypen der Kopfentwicklung, der
Extremitätenentwicklung, der Entwicklung der thorakalen Muskulatur und der sonsti-
gen Puppenmorphologie zu detektieren. Für die sinnvolle Auswertung des Muskel-
musters ist der richtige Zeitpunkt wichtig, da das Muster sich erst im Laufe des
Puppenstadiums entwickelt. In frisch geschlüpften Imagines ist das Muster durch die
vorerst noch helle Kutikula zwar gut sichtbar, die Motilität der Käfer und das enge
Zeitfenster bis zur vollständigen Färbung der Kutikula machen aber die Analyse der
Puppenstadien einfacher und deutlich schneller.
Die Tiere werden wiederum mit Männchen des SB- bzw. des black-Stamms ver-
paart, diesmal aber als Einzelverpaarungen mit jeweils zwei Männchen. Dies erleich-
tert später die zeitsparende Identifizierung einzelner Weibchen mit verminderter
Legeleistung, was bei der pupalen Injektion wegen der Notwendigkeit möglichst
großer Gelege mehrerer Weibchen nicht möglich ist.
Kontrolle der pupal-adult-Häutung, Start der Eiablage (Tag 20 - 23)
Falls eine hohe Zahl an injizierten Tieren während der Imaginalhäutung stirbt,
was auf Fehler der Metamorphose-Kontrolle hinweist, werden diese analysiert und
dokumentiert. Außerdem wird eine Eiablage der nun geschlechtsreifen Tiere für die
spätere Auswertung begonnen. Diese Synchronisierung der Ablagen ist nötig, um
den späteren quantitativen Vergleich zu erlauben.
Dieser Arbeitsschritt kann nach ca. 20 bis 23 Tagen stattfinden, da hier kein ex-
akter Zeitabstand zum vorherigen Arbeitsschritt nötig ist.