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II. 3. Diskussion
Screen keine teure, dauerhafte und arbeitsintensive Stammhaltung der Linien mit
interessanten Phänotypen, was noch schwerer wiegt, da diese Stammhaltung in
Tribolium wegen des Mangels an Balancer-Chromosomen äußerst aufwändig ist
(Berghammer et al., 1999a). Ebenfalls nicht nötig ist die sehr zeitintensive Identifizie-
rung der betroffenen Gene. In einem RNAi-Screen als einer Methode der reversen
Genetik (Adams und Sekelsky, 2002) ist das Zielgen der injizierten dsRNA bereits
zum Zeitpunkt des Screens bekannt. Schließlich kommt der Frage der Saturierung
nur mehr eine untergeordnete Rolle zu, da diese nun leichter zu bestimmen und zu
beeinflussen ist, als das bei klassischen genetischen Screens der Fall war (Pollock
und Larkin, 2004). Die Kombination aus cDNA-basierter und Genom-Annotations-
basierter Genauswahl sollte dazu führen, dass nahezu alle Tribolium-Gene für iBeet-
le verfügbar sind.
Obwohl der Pilot-Screen von dieser Saturierung natürlich weit entfernt ist, konn-
ten dennoch weitere Vorteile bereits bei dessen Durchführung illustriert werden. So
erlaubt beispielsweise die larvale Injektion von dsRNA die Analyse von Entwick-
lungsprozessen während der Metamorphose, ohne von einer eventuellen embryona-
len Funktion der untersuchten Gene verhindert zu werden, was in klassischen gene-
tischen Screens ein Problem darstellt (St Johnston, 2002). Bereits im Pilot-Screen
führten beispielsweise die RNAs #8 und 78 (similar to rac, similar to thioredoxin-like
protein, Abb. 36, Abb. 37) nach larvaler Injektion zu Defekten der pupalen Flügel
bzw. der adulten Beine, nach pupaler Injektion aber zu frühembryonaler Letalität. Ein
weiteres Beispiel in diesem Zusammenhang stellen die neu gefundenen Metamor-
phose-Phänotypen der für embryonale Funktionen bekannten Positiv-Kontrollen dar
(Abb. 38).
Während des Pilot-Screens wurde zudem deutlich, dass eine relativ kleine Zahl
injizierter Tiere ausreicht, um die Screen-Ziele zu erreichen. Auch dieser Punkt ist ein
Vorteil eines RNAi- gegenüber einem genetischen Screen. Durch die hohe Penet-
ranz der RNAi genügen wenige Tiere zur Auswertung. In klassischen genetischen
Screens ergibt sich hingegen schon aus den nötigen Kreuzungen, dass nur 1/3 bis
1/4 der untersuchten Tiere die Mutation homozygot tragen (St Johnston, 2002).
Unter Ausnutzung dieser Vorteile sollen durch iBeetle drei übergeordnete Ziele
erreicht werden. Erstens sollen durch die Detektion interessanter Genfunktionen in
Tribolium die Grundlagen für neue und bisher in Drosophila vernachlässigte For-
schungsrichtungen gelegt werden. Zweitens sollen Kandidatengene für wichtige
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