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Allgemeine Diskussion
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Zweitens zeigten die Arbeiten an nanos und pumilio Lücken auf, die momentan
nicht durch eventuelle Funktionen bereits aus Drosophila bekannter Faktoren erklärt
werden können. So bleibt beispielsweise unklar, wie die Expression von OTD-1
reguliert wird. Die anterioren Defekte nach nanos/pumilio-RNAi legen außerdem die
Beteiligung eines bisher unbekannten anterioren Faktors nahe. Solche Lücken
offenbaren sich auch in anderen Zusammenhängen, wie beispielsweise der Regula-
tion des CAUDAL-Repressors mex-3 (Schoppmeier et al., 2009).
In diesem Kapitel wurden also etablierte Methoden verwendet um die Funktion
zweier aus Drosophila bekannter Faktoren in Tribolium zu untersuchen. Dabei zeig-
ten sich anhand der Ergebnisse die Schwächen dieses auf Kandidaten-Genen aus
Drosophila basierten Ansatzes.
Im zweiten Kapitel wurden sowohl parentale als auch larvale RNAi (Tomoyasu
und Denell, 2004) verwendet, um ein Vorgehen zu entwickeln, das die Limitierungen
dieses Kandidaten-Gen-Ansatzes überwinden kann. Dabei konnte ein Protokoll für
den genomweiten Einsatz pupaler und larvaler RNAi entworfen und in einem Pilot-
screen getestet werden, das im Rahmen des geplanten iBeetle-Projekts die Analyse
aller Tribolium-Gene auf ihre Funktion in embryonalen und postembryonalen Ent-
wicklungsprozessen ermöglichen wird.
Durch dieses Vorgehen wird es möglich sein Gene zu identifizieren, die eine Rol-
le für die Embryonalentwicklung Triboliums spielen, in diesem Zusammenhang aber
nicht aus Drosophila bekannt sind. So könnten solche Gene beispielsweise durch
technische Schwierigkeiten wie unvollständige Saturation oder dem Vorhandensein
von maternaler und zygotischer Aktivität in genetischen Screens unentdeckt geblie-
ben sein. Oder sie haben ihre Funktion in Drosophila verloren bzw. dort oder in
Tribolium ihre Funktion verändert und sind somit nur aus anderen Zusammenhängen
bekannt. Schließlich könnten solche Faktoren auch im Laufe der Fliegen-Evolution
verlorengegangen sein, aber trotzdem anzestrale Gene darstellen, die somit in
Tribolium untersucht werden könnten. Diese Annahme wird durch den Befund ge-
stützt, dass die Genomsequenz von Tribolium einer langsamer verlaufenden evoluti-
onären Veränderung unterlag als die von Drosophila und sich viele Vertebraten-
Gene finden lassen zu denen ein Tribolium- aber kein Drosophila-Ortholog existiert
(Tribolium Genome Sequencing Consortium, 2008).
Somit wird iBeetle mit hoher Wahrscheinlichkeit Kandidatengene liefern, die auch
bei der Aufklärung der noch offenen Fragen über die blastodermale Musterbildung