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I. 2. Ergebnisse
Expression auf die anteriore Hälfte des Embryos zurück. Es ist natürlich möglich, und
vor allem im Hinblick auf die verhältnismäßig schwachen anterioren nos/pum-
Phänotypen interessant, dass eine subtile Veränderung des lokal begrenzten OTD-1-
Proteingradienten in der Mitte des Blastoderms oder temporale Abweichungen der
OTD-1-Regulation zum Phänotyp nach nos/pum-RNAi beitragen. Solche schwachen
Veränderungen der OTD-1-Expression konnten wegen der dynamischen Entwicklung
der Expression durch die hier verwendetetn Methoden wahrscheinlich nicht detektiert
werden.
Allerdings sind in deutlich späteren Stadien Veränderungen des OTD-1-Musters
zu beobachten. Im wachsenden Keimstreif wird OTD-1 in einer schmalen Reihe von
Mittellinienzellen exprimiert (Abb. 16, C). Im Wildtyp überschreitet die Breite dieses
antero-posterioren Streifens nie drei nebeneinander liegende Zellen (Abb. 16, C).
Nach pumilio- oder nos/pum-RNAi allerdings, umfasst der Streifen etwa doppelt so
viele Zellen (Abb. 16 D, E). Es kommt also zu einer Missexpression von OTD-1.
Obwohl vollkommen unklar ist, ob diese Regulation direkt von NOS/PUM abhängt,
bietet dieser Befund zumindest eine mögliche Erklärung für das Vorhandensein des
NREs im 3’ UTR der otd-1-mRNA. Die Verbreiterung der Mittelliniendomäne ist nach
pumilio- und nos/pum-RNAi, nicht aber nach nanos-RNAi beobachtbar (Abb. 16, D,
E, bzw. nicht gezeigt). Entweder ist dies also eine nanos-unabhängige Funktion des
PUMILIO-Proteins, oder dieser Prozess zeigt sich als nicht ausreichend sensibel für
die Transkriptreduktion durch nanos-RNAi und verhindert somit die Ausprägung des
Phänotyps.
Eine vergleichbare Analyse der HUNCHBACK-Protein-Expression konnte leider
nicht durchgeführt werden, da der von Wolff et al. (1995) verwendete Antikörper
gegen das HB-Protein nicht mehr verfügbar ist. Wolff et al. konnten zeigen, dass die
HB-Expression am posterioren Pol des frühen Blastoderms offenbar translationell
reprimiert wird, während die maternale hb-mRNA noch ubiquitär vorhanden ist (Wolff
et al., 1995). Auch in diesem Fall wurden NANOS und PUMILIO als mögliche Re-
pressoren vorgeschlagen. Meine Analyse der mRNA-Expression zeigte keine
feststellbaren Veränderungen in nos/pum-RRNAi-Embryonen, die möglicherweise
einen Hinweis auf Veränderungen der Proteinexpression hätte liefern können (nicht
gezeigt).
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