Dokument 1.pdf - OPUS - Friedrich-Alexander-Universität Erlangen ...

I. 2. Ergebnisse
des Kopfes. Außerdem reagiert sie empfindlicher auf den Abbau der pumilio- als auf
den der nanos-mRNA. Begleitet wird dieser Befund von der Tatsache, dass nur
dsRNA des längsten nos-Fragments zu Defekten führte (s. 4.1).
Bekanntermaßen führt RNAi gegen verschiedene Gene nicht in allen Fällen mit
gleicher Effizienz zu Funktionsverlustphänotypen (Kennerdell und Carthew, 1998).
Diese Effektivitäts-unterschiede könnten auf unterschiedliche Ursachen zurückzufüh-
ren sein. Einerseits ist denkbar, dass die RNAi-Maschinerie (Meister und Tuschl,
2004) für verschiedene dsRNAs bzw. mRNAs nicht gleich effizient arbeitet und somit
das mRNA-Niveau unterschiedlich stark gesenkt wird. Zellkulturstudien an humanen
Zellen zeigen, dass schon verschiedene siRNAs gegen die gleiche mRNA sehr
unterschiedliche Effekte auf das mRNA-Niveau haben können (Holen et al., 2002).
Die Autoren spekulieren, dass mRNA-bindende Proteine eine Ursache dieser Positi-
onseffekte sein könnten. In Drosophila wird die nanos-mRNA lokalisiert und translati-
onell reguliert, was durch postulierte und teilweise untersuchte RNA-bindenden
Faktoren vermittelt wird (Wharton und Struhl, 1989; Bergsten und Gavis, 1999;
Bergsten et al., 2001; Zaessinger et al., 2006; Jain und Gavis, 2008). Möglicherweise
hemmt die Bindung solcher Faktoren die RNA-Interferenz in Tribolium. Andererseits
sind unterschiedliche Prozesse sicherlich nicht gleich empfindlich gegenüber der
Reduktion der einen oder anderen mRNA auf ein bestimmtes Niveau. Das bedeutet,
dass die Schwellenwerte für die Ausprägung unterschiedlicher Phänotypen differie-
ren, und von dem jeweiligen Gen und dem betroffenen Gewebe abhängen. Dies
könnte auch der Grund für die Unterschiede in der Ausprägung der anterioren Defek-
te in den RNAi-Experimenten sein.
Die unterschiedliche Penetranz der Effekte insgesamt, sowie der Kopf- und der
abdominalen Defekte legt nahe, dass durch die RNAi-Experimente kein vollständiger
„knock-down“ erreicht wird. Um dies zu erreichen wurde versucht, den vollständigen
Funktionsverlust durch gleichzeitige Inhibierung beider Genprodukte zu erreichen.
53