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I. 2. Ergebnisse
2.4.2. nanos/pumilio-RNAi induziert Defekte in frühen embryonalen
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Stadien
Da ich zeigen konnte, dass nanos/pumilio-RNAi zu Defekten in elongierenden
Keimstreifen führt, ergibt sich nun die Frage, ob auch in früheren Entwicklungssta-
dien Veränderungen beobachtbar sind, die damit in Zusammenhang stehen könnten.
In Drosophila sind die wichtigsten Faktoren für die Regionalisierung des Blastoderms
die Transkriptionsfaktoren der Gruppe der Gap-Gene (Rivera-Pomar und Jäckle,
1996). Obwohl diese in Tribolium durchaus andere Funktionen aufweisen als in der
Fliege, so werden sie doch schon in frühen Stadien in distinkten Domänen expri-
miert, und ihre Funktionsreduktionsphänotypen weisen Segmentierungsdefekte auf
(Wolff et al., 1995; Bucher und Klingler, 2004; Cerny et al., 2005; Savard et al.,
2006a; Cerny et al., 2008; Marques-Souza et al., 2008). Zur weiteren Analyse der
nanos/pumilio Funktion wurde also die Expression von verschiedenen Gap-Genen
untersucht.
Die mRNA-Expression der Transkriptionsfaktoren giant und knirps zeigt in der
Tat Veränderungen in nos/pum-RNAi-Embryonen (Abb. 14, A-D; Abb. 15, E-H). In
Wildtyp Embryonen ist maternale gt-mRNA zunächst gleichmäßig verteilt (Bucher
und Klingler, 2004). Sie zieht sich dann, vermutlich nach der Aktivierung des zygoti-
schen Genoms, vom anterioren und posterioren Pol zurück, um eine zentrale blasto-
dermale Domäne mit einem Streifen stärkerer Expression im Bereich der maxillären
Anlage zu bilden. Im differenzierten Blastoderm entsteht in der Folge eine Domäne
im Bereich der posterioren Invagination, die während der Bildung des Keimrudiments
an dessen posterioren Ende erhalten bleibt (Abb. 14, A; Abb. 15, E) und sich nach
Beginn der Keimstreifstreckung in zwei segmentale Domänen im dritten thorakalen
und im zweiten abdominalen Segment aufspaltet. Diese verschwinden im Laufe der
weiteren Entwicklung, ebenso wie die maxilläre Expression, während sich mehrere,
vermutliche neurale, Expressionsdomänen in der Kopfanlage entwickeln (Bucher und
Klingler, 2004).
knirps-mRNA wird im Gegensatz zu giant erst im Blastoderm exprimiert (Cerny et
al., 2008). Eine große Domäne, die zunächst das Blastoderm beinahe vollständig
überspannt, zieht sich im weiteren Verlauf wiederum auf eine zentrale Domäne
zurück, die sich zu einem Streifen innerhalb der mandibulären Segmentanlage
differenziert. Im Bereich der posterioren Invagination entsteht dann eine weitere