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I. 2. Ergebnisse Abb. 12: Verteilung der anterioren Defekte nach nanos/pumilio-RNAi Gezählt wurden alle Larven, die phänotypische Veränderungen aufwiesen. Transformationen bedeuten im Falle von nos-RNAi meist Transformationen labialer Palpen zu beinähnlichen Strukturen, bei pum- und nos/pum-RNAi in der Regel Transformationen von Mandibeln hin zum Charakter anderer gnathaler Anhänge, vermutlich der Maxille. Bei Deletionen sind in aller Regel Antennen oder Mandibeln betroffen. Nicht in allen Fällen sind beide Anhänge eines Segments betroffen. 56 Injektionen in adulte Käfer, sowie pum-dsRNA Injektionen in präblastodermalen Embryonalstadien ergaben keine deutlich abweichenden, stärkeren oder höher penetranten Effekte (nicht gezeigt). Adulte Doppel-RNAi führte zu höherer Legeleis- tung als pupale Injektionen, aber zu schwächeren Phänotypen. Auch eine Kombina- tion aus pupaler nanos- und adulter pumilio-Injektion führte nicht zu den stärksten Effekten. Die Reduktion des Expressionsniveaus von nanos und pumilio führt also sowohl zu posterioren als auch zu anterioren Defekten. Dies ist überraschend, da beide bisher als Gene der posterioren Gruppe beschrieben wurden (siehe Einleitung; (St Johnston und Nüsslein-Volhard, 1992). In Drosophila ist diese posteriore Funktion außerdem auf sehr frühe Prozesse der Embryonalentwicklung zurückzuführen. Um zu untersuchen, ob dies für die Effekte der hier beschriebenen RNAi-Experimente ebenso gilt, ist die Analyse embryonaler Stadien notwendig.
I. 2. Ergebnisse 2.4. Frühembryonale Defekte führen zu einem vorzeitigen Ab- bruch der Segmentierung in nanos/pumilio-RNAi-Embryonen Die bereits erläuterten morphologischen Defekte der larvalen Kutikula nach nanos- und pumilio-RNAi könnten auf zwei unterschiedliche Arten während der Embry- onalentwicklung hervorgerufen werden. Entweder sie sind das Produkt von Fehlern während der Segmentbildung, also im Laufe der embryonalen Musterbildung, oder sie entstehen in der Folge irregulärer Prozesse während der nachfolgenden Gewe- bedifferenzierung. Zwischen diesen Alternativen kann durch die morphologische Analyse embryonaler Stadien unterschiedlichen Alters, bzw. durch die Anwendung molekularer Marker mit informativen Expressionsmustern unterschieden werden. 2.4.1. Die Segmentbildung aus der Wachstumszone ist gestört Zur Analyse der frühen Segmentbildung eignet sich die Expression des Segment- Polaritäts-Gens wingless. Das Expressionsmuster von wingless scheint innerhalb der Insekten hoch konserviert zu sein (Peel et al., 2005). In Drosophila bilden die anein- ander angrenzenden Domänen von wingless und engrailed Kompartmentsgrenzen, sie definieren die Parasegmente (Martinez-Arias et al., 1988). In Tribolium wird wg zunächst in zwei okularen und einer posterioren Domäne im Blastoderm exprimiert (Nagy und Carroll, 1994). Im Laufe der Keimstreifstreckung werden paarige segmentale Streifen in antero-posteriorer Progression gebildet und ebenfalls paarige Domä- nen in unterschiedlichen Bereichen des anterioren Kopfes angelegt. Die bereits im Blastoderm sichtbare posteriore Domäne in der Wachstumszone wird aufrechterhal- ten und die endet schließlich in der Proktodeumsanlage (Abb. 13, A; Nagy und Carroll, 1994). Die segmentalen Streifen bleiben auch während der weiteren Diffe- renzierung des Embryos erhalten und lassen somit auch zu späteren Zeitpunkten noch Rückschlüsse auf die Segmentbildung zu. Das Alter der Embryonen kann anhand der Entwicklung der Beinanlagen und der gnathalen Extremitäten sowie der wg-Expression im Kopf gut abgeschätzt werden. In nos/pum-RNAi Embryonen sind segmentale wg-Domänen zwar nachweisbar, sie zeigen aber Veränderungen der aus der Wachstumszone hervorgehenden Seg- mente an (Abb. 13, B). Zum einen wird deutlich, dass nicht alle abdominalen wg- Domänen gebildet werden, zum anderen zeigen die vorhandenenen wg-Streifen irreguläre Muster. Meist sind die anterioren ein bis drei wg-Domänen im abdominalen 57
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Die Funktion von Genen der posterio
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Danke! Obwohl als letztes verfasst,
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Allgemeine Diskussion Allgemeine Di
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Allgemeine Diskussion und Achsendet
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Anhang ACCCATCCGTACGGCTGCCGGGTCATTC
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Anhang 2. Ergänzende Ergebnisse zu
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238 43 1000 99 similar to Rab-prote
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Anhang gemischt embryonal letal von
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Literatur Literatur Abdel-Latief, M
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Literatur Bernstein, D., Hook, B.,
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Literatur Ciglar, L. und Furlong, E
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Literatur Falciani, F., Hausdorf, B
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Literatur Gutjahr, T., Vanario-Alon
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Literatur Kiger, A. A., Baum, B., J
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Literatur Lin, H. und Spradling, A.
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Literatur binding protein that phys
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Literatur Riddiford, L. M., Hiruma,
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Literatur Schüpbach, T. und Wiesch
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Literatur Tomoyasu, Y., Miller, S.
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Literatur Zhang, X. D. und Heyse, J
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