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II. 3. Diskussion
Ausfallphänotyps (einer Positiv-Kontrolle) zeigt aber, dass dies prinzipiell möglich ist.
Vermutlich war die Anzahl der untersuchten Gene zu gering, um hier ein neues
Kandidaten-Gen zu finden. Auch in einem Drosophila-RNAi-Screen für Muskelphäno-
typen führten beispielsweise nur ca. 1,8 % der Linien zu morphologisch erkennbaren
Muskeldefekten (Schnorrer et al., 2010).
Auch nach larvaler Injektion konnten einige interessante Phänotypen detektiert
werden (Abb. 36, Abb. 37). Diese wurden nicht nur bei der Analyse der pupalen,
sondern auch der adulten Stadien gefunden. Dabei zeigte sich beispielsweise, dass
subtile Defekte, wie die Verkürzung distaler Beinsegmente (Abb. 37), nur bei der
Untersuchung der adulten Morphologie festgestellt werden können. Auch die Aus-
wertung der Legeleistung und der Stink-Drüsen nach larvaler dsRNA-Injektion erwie-
sen sich als erfolgreich und sinnvoll durchführbar (Abb. 34, Abb. 37).
Die Analyse der Legeleistung wurde während des Pilot-Screens in Form von Ein-
zelverpaarungen durchgeführt, um die maximale Sensitivität zu erreichen. Im Rah-
men des Hauptscreens sollten nur Injektionen, die bei mindestens der Hälfte der
injizierten Tiere zu verminderter Legeleistung führen, auf ihren Ovarphänotyp hin
kontrolliert werden. Während des Pilot-Screens wurden allerdings alle Tiere mit
verminderter Legeleistung präpariert. Dabei wurde deutlich, dass durch die Einzel-
verpaarungen vermutlich keine wesentliche Steigerung der Sensitivität erreicht wird.
In elf larvalen Injektionen wurde eine verminderte Legeleistung in mindestens der
Hälfte der Einzelverpaarungen festgestellt (vier möglicherweise „interessante“, fünf
unspezifische „held-egg“-Phänotypen). In zwei Fällen (ein interessanter, ein „held-
egg“-Phänotyp) trat die verminderte Legeleistung bei der Hälfte der überlebenden
Tiere auf, bei den restlichen Injektionen bei allen verbleibenden Tieren. Das heißt,
diese wären höchstwahrscheinlich alle ebenso in einer „Gruppenverpaarung“ erkannt
worden. Bei den restlichen Injektionen traten in 26 Fällen bei maximal einem Drittel
der Einzelverpaarungen verminderte Legeleistung auf. Diese Fälle würden also nicht
auf ihren Ovarphänotyp hin untersucht werden und sie zeigten tatsächlich auch
durchwegs keine interessanten Phänotypen. Möglicherweisen würden im Rahmen
des Hauptscreens etwas mehr dieser unauffälligen Reduktionen auf ihren Ovarphä-
notyp untersucht werden, wenn die Tiere in Gruppenverpaarungen gehalten werden,
dies steht aber sicherlich in keinem Verhältnis zum zusätzlichen Mehraufwand der
Einzelverpaarungen von ca. 2,5 bis 4 h pro Injektionsdurchgang. Somit bin ich der
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