Anais da 27º Semana Científica - Hospital de Clínicas de Porto Alegre

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Revista HCPA 2007; 27 (Supl.1)
SUPORTE ESTROMAL DE CULTURAS DE BAÇO: UM APOIO PARA A GERAÇÃO E MANUTENÇÃO DE CÉLULAS
DENDRÍTICAS?
JÓICE MERZONI; ELVIRA ALICIA CORDERO, LUIZ FERNANDO JOBIM, MARINA CAROLINA MOREIRA,
FERNANDA LINDHAL, LIANE DAUDT, LUCIA MARIANO DA ROCHA SILLA (ORIENT.)
Na vida adulta, a hematopoese acontece na medula óssea sendo o baço um órgão hematopoético auxiliar. Este é o único órgão
linfóide interposto na circulação sanguínea e devido a esta característica responde com rapidez aos antígenos que penetram no
organismo, sendo um importante filtro fagocitário e imunológico para antígenos solúveis. As células dendríticas, encontradas no
interior dos órgãos linfóides secundários, são células hematopoéticas responsáveis pela apresentação de peptídeos antigênicos aos
linfócitos. O estudo do desenvolvimento e da função das células dendríticas tem se mostrado difícil pela baixa quantidade destas
células circulantes no organismo humano. Estudos recentes têm demonstrado a geração de células dendríticas a partir do estroma
derivado de baço. Nosso objetivo é avaliar a importância do suporte estromal derivado de culturas de células hematopoéticas
oriundas do baço para a geração e manutenção de células dendríticas. As técnicas utilizadas foram a coloração giemsa e a cultura
celular de longo termo. Foram realizadas culturas celulares provenientes de 10 baços e 4 medulas ósseas. Resultados parciais
apontam que, corada ao giemsa, a porção não aderente das culturas de baço apresenta células de baixa complexidade, com poucos
grânulos intracelulares e algumas células com citoplasma vacuolizado, características não descritas nas células dendríticas
provenientes da medula óssea. Ao microscópio invertido, a porção estromal, por volta do 15º dia, apresenta grande parte das
células com morfologia fibroblástica. As culturas de medula óssea iniciaram a aderência estromal e a formação de regiões de
nicho celular por volta do 4º dia de cultura e as culturas do baço somente ao 9º. Prosseguiremos com a realização da citometria de
fluxo com anticorpos monoclonais Anti-CD11c, CD11b, CD80, CD86 e MHC-II para caracterização destas células.
COMPARAÇÃO DOS MEIOS DE CULTURA DMEM X RPMI PARA CULTURA DE CÉLULA TRONCO MESENQUIMAL
HUMANA DE ORIGEM TECIDO ADIPOSO
MARINA CAROLINA MOREIRA; JÓICE MERZONI; JULIANA MONTEIRO FURLAN; RINALDO DE ANGELI PINTO;
GUSTAVO ADOLPHO MOREIRA FAULHABER; LUCIA MARIANO DA ROCHA SILLA
As células tronco mesenquimais (MSC) constituem um grupo de células tronco presentes em diversos tecidos, cuja função parece
ser a regeneração tecidual. Caracterizam-se pela multipotencialidade diferenciando-se, sob condições apropriadas, em
osteoblastos, condrócitos e adipócitos. Recentemente as MSC foram isoladas de outros tecidos tais como tecido adiposo, sinóvia,
polpa dental, sangue de cordão umbilical e sangue periférico. Destes, o tecido adiposo têm sido amplamente estudado pela
facilidade de obtenção e possibilidade de extração de grandes volumes de tecido, tendo comprovado potencial multi-linhagem a
partir de lipoaspirados de roedores. Em estudos comparativos de MSC oriundas da medula óssea e tecido adiposo, estas não
diferiram frente ao comportamento in vitro, marcadores de membrana e capacidade de diferenciação. Porém, a falta de protocolos
padrões para preparação e cultura permanece um obstáculo para pesquisa e aplicação clínica destas células, pois para isso há a
necessidade de cultivo in vitro. Este trabalho visa comparar dois meios de cultura, RPMI e DMEM, para crescimento de MSC a
partir do tecido adiposo, estabelecendo um protocolo de cultivo para estas células. Os fragmentos de tecido adiposo serão obtidos
de pacientes submetidos a procedimentos cirúrgicos eletivos. Serão analisadas 68 observações em placa. Os fragmentos serão
submetidos à digestão por colagenase 0,075% (tipo I) a 37ºC para obter as células de interesse. Posteriormente estas células serão
induzidas à diferenciação e coradas para confirmar multipotencialidade. A partir de dois experimentos nos quais foram cultivados
fragmentos oriundos da mama e do dorso, obteve-se uma quantidade satisfatória de células com alta viabilidade, confirmando os
relatos da literatura.
COMPARAÇÃO DOS MEIOS DE CULTURA DMEM X RPMI PARA CULTURA DE CÉLULA TRONCO MESENQUIMAL
HUMANA DE ORIGEM MEDULA ÓSSEA
MARINA CAROLINA MOREIRA; JÓICE MERZONI; JULIANA MONTEIRO FURLAN; GUSTAVO ADOLPHO MOREIRA
FAULHABER; LUCIA MARIANO DA ROCHA SILLA
As células tronco mesenquimais (MSC) constituem um grupo de células tronco presentes em diversos tecidos, cuja função parece
ser a regeneração tecidual. São caracterizadas pela multipotencialidade diferenciando-se, sob condições apropriadas, em miócitos,
osteoblastos, condrócitos e adipócitos. Estas células representam uma pequena fração (0,001 – 0,01%) da população total de
células nucleadas da medula óssea (MO). Entretanto podem ser isoladas, expandidas e diferenciadas in vitro, retendo seu potencial
de diferenciação após várias passagens. Devido à facilidade de acesso, expansão in vitro e capacidade de diferenciação em vários
tipos celulares, as MSC são de grande interesse para aplicação clínica. Porém, a falta de protocolos padrões para preparação e
cultura permanece um obstáculo para pesquisa e aplicação destas células, pois para uso terapêutico, elas precisam ser semeadas e
enriquecidas utilizando técnicas de cultura celular. Este trabalho visa comparar dois meios de cultura, RPMI e DMEM, para
crescimento de células tronco mesenquimais. Para isso, estas células serão obtidas da MO de pacientes sadios doadores de MO e
pacientes portadores de hematopatias benignas, submetidas à separação por gradiente de densidade e plaqueadas nos dois meios
em estudo. Serão analisadas 68 observações em placa. Posteriormente, serão induzidas a diferenciação e coradas para confirmar a
multipotencialidade. Foram cultivadas até o momento sete amostras de MO, a partir das quais se obteve células com morfologia
fibroblastóide características de MSC.
THE EXPRESSION OF CD59 AND CD55 IN HEALTHY BRAZILIAN INDIVIDUALS ON RED CELLS AND
LEUCOCYTES
ANA PAULA ALEGRETTI; TEREZINHA MUNHOZ, CHRISTINA BITTAR, SUZANE BÓ, FERNANDO KREUTZ, ALINE
CHIES, RICARDO XAVIER
Paroxysmal nocturnal hemoglobinuria (PNH) is a disorder characterized by a defect in the GPI anchor due to an abnormality in
the PIG-A gene. This leads to partial or complete absence of certain GPI-linked proteins, particularly CD59 and CD55, that have a
major role in the inhibition of the action of complement on the cellular membrane of blood cells. PNH should be considered in a