Anais da 27º Semana Científica - Hospital de Clínicas de Porto Alegre

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Revista HCPA 2007; 27 (Supl.1)
formação dessas lesões. OBJETIVO: padronizar as condições das reações de PCR em tempo real para a isoforma B do PR.
MATERIAL E MÉTODOS: as amostras foram coletadas de pacientes submetidas à retirada cirúrgica de fibroadenomas no
Serviço de Mastologia do HCPA, sendo imediatamente congeladas. O RNA total foi extraído pelo reagente TRIZOL e utilizado
para a síntese de cDNA. Foram utilizadas 3 amostras para a padronização, sendo avaliadas as variáveis: ng de cDNA,
concentração e tempo de anelamento dos primers. Os resultados de fluorescência do corante Syber Green I foram expressos em
unidades arbitrárias (UA). RESULTADOS: para o fragmento correspondente ao mRNA do PRB foram avaliadas as quantidades
de cDNA de 1; 0,4; 0,2; 0,1 e 0,02 ng, na presença de 5mM de primers, resultando em valores de fluorescência de 0,026; 0,014;
0,027; 0,022 e 0,016 UA, respectivamente. A seguir foram avaliadas as concentrações de primers de 5 e 3 mM, com 0,2 ng de
cDNA, resultando em valores de fluorescência de 0,027 e 0,022 UA, respectivamente. Os tempos de anelamento avaliados foram
45 e 40 s, na presença de 0,2 ng de cDNA e 5 mM de primers, resultando em 0,022 e 0,02 UA. CONCLUSÕES: As melhores
condições de PCR em tempo real para avaliar a expressão gênica do PRB são 0,2 ng de cDNA, 5 mM de primers e 40 s de
anelamento. A partir destes resultados será comparada a expressão de PRB nas amostras de tecido mamário normal e
fibroadenomas.
CRIOPRESERVAÇÃO DE ESPERMATOZÓIDES EQÜINOS COMPARANDO DUAS CURVAS DE CONGELAMENTO
COMBINADAS COM DILUENTES COMERCIAIS
PAULA BARROS TERRACIANO; IVAN CUNHA BUSTAMANTE-FILHO; LUDMILA DO VALE MIQUELITO;
TAMARINI RODRIGUES ARLAS; FABIANA CASTRO; RODRIGO COSTA MATTOS; EDUARDO PANDOLFI PASSOS;
ENEDER ROSANA OBERST; ELIZABETH OBINO CIRNE LIMA.
Durante o processo de criopreservação de sêmen, os espermatozóides sofrem alguns danos que resultam na diminuição da
fertilidade deste. O presente estudo foi realizado a fim de avaliar o efeito da utilização combinada de duas curvas de
congelamento com dois diluentes comerciais sobre a criopreservação de sêmen eqüino. Foram analisados 20 ejaculados. As
amostras foram avaliadas, pela motilidade progressiva e total do sêmen pós-descongelamento e pela integridade (CFDA/PI) e
funcionalidade da membrana (teste hiposmótico) dos espermatozóides. A combinação entre curva automatizada e Botu-Crio®
apresentou as maiores médias, nas análises de motilidade total (55,53%) e progressiva (17,25%), após o descongelamento. O
diluente Botu-Crio® , isoladamente, preservou também as membranas destes, quando foram realizadas as análises de integridade
(CFDA/PI) e funcionalidade de membrana pelo teste hiposmótico.
EXPRESSÃO DE DD3 E TROMBOSPONDINA EM TUMORES PROSTÁTICOS.
DIEGO BROMFMAN PIANTA; VANDERLEI BIOLCHI; WALTER JOSÉ KOFF; LUIGI BRESCIANINI; MILTON
BERGER; ILMA SIMONI BRUM
Introdução: doenças de próstata são condições frequentemente encontradas em homens e sua incidência aumenta
exponencialmente com o aumento da idade. Estudos têm sido desenvolvidos buscando identificar novos marcadores de tumores
em estágios iniciais de desenvolvimento e diferenciar tumores benignos de malignos. DD3 tem sido considerado como um gene
de expressão específica para câncer de próstata. Trombospondina (TSP1) é um potente inibidor da angiogênese e pode ser
importante no controle do crescimento tumoral. Objetivo: quantificar a expressão de DD3 e TSP1 em amostras de câncer, HPB e
tecido prostático adjacente ao câncer. Materiais e Métodos: amostras de tecido foram coletadas de pacientes submetidos à
prostatectomia aberta (HPB), ou prostatectomia radical (câncer e tecido adjacente). As amostras foram armazenadas em
nitrogênio líquido, o RNA extraído pela técnica do Trizol®, feita a síntese de cDNA e RT-PCR. Os resultados de RT-PCR foram
normalizados com o gene β2m e expressos como média±EP. Resultados e conclusões: A análise preliminar de 39 amostras não
mostra diferença significativa na expressão de DD3 entre os três grupos comparados: câncer 0,810±0,057, tecido adjacente
0,779±0,048, HPB 0,864±0,037. A expressão de TSP1 é significativamente maior em HPB (p