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14 XV JORNADAS CIENTÍFICAS DE LA S.E.O.C.
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plásmido bacteriano
Gen do rasistancia a
la Terramicina
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Fig. 1.—Reconocimiento de una secuencia de bases y rotura
de la doble cadena de ADN por la endonucleasa de restricción
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Los distintos fragmentos tienen un peso molecular
diferente y por ello se pueden aislar mediante electroforesis.
Al hacer pasar una corriente eléctrica por un
gen a base de agarosa, el ADN se desplaza hacia uno
de los polos, pero los fragmentos más pequeños lo hacen
a mayor velocidad, lo que hace posible separar
unos de otros.
Una vez aislado, el fragmento se integra en un vector,
esto es, un agente capaz de introducirse en células
vivas y replicarse. Normalmente se trata de un
plásmido bacteriano o de levadura o un virus. Vector
y fragmento se unen en un punto conocido con un pegamento
enzimático, una ligasa, y esta construcción
se coloca en contacto con células para que se introduzca
en ellas y se replique. Las más utilizadas son
las bacterias, especialmente el Escherichia coli, ya
que con su gran velocidad de crecimiento permite obtener
multitud de copias o «clones» del gen en un corto
espacio de tiempo (fig. 2).
El reconocer entre las colonias cuáles son las que
han integrado el gen sería una tarea interminable,
por esa razón el vector lleva también un mecanismo
que permite su aislamiento. Por ejemplo, en el caso
de un plásmido suele seleccionarse aquel que lleve
en su dotación el gen de resistencia a algún antibiótico.
Basta añadir éste al medio para saber que las colonias
supervivientes poseen el gen. Una vez conseguido
un cultivo en cantidad suficiente, se procesa, se
aisla el ADN y se procede a abrir los plásmidos con
las endonucleasas específicas. Los fragmentos se
vuelven a aislar por electroforesis, obteniéndose el
gen puro y concentrado.
INGENIERÍA GENÉTICA Y SANIDAD ANIMAL
La sanidad animal es una parte importante en la
producción. Esta se incrementa notablemente si se lo-
plasmida cariado
Fragmentos de ADM exógono
Fig. 2.—Apertura de un vector plásmido e inserción de un
fragmento de ADN exógeno.
gra reducir la incidencia de enfermedades. La ingeniería
genética tiene una aplicación práctica clara al
menos en cinco situaciones (7, 15): .
— Diagnóstico de enfermedades.
— Desarrollo de vacunas recombinantes.
— Producción de agentes terapéuticos.
— Obtención de animales transgénicos genéticamente
resistentes.
— Tratamiento de enfermedades metabólicas.
Diagnóstico de enfermedades
El primer sistema de diagnóstico desarrollado con
técnicas relacionadas con la ingeniería genética fue la
utilización de endonucleasas de restricción. Con ellas
SONDAS DE ADZT
A> Obtención de la sonda
O Reacción de diagnóstlc
^4^
Fig. 3.—Metodología para la identificación y diagnóstico de
agentes patógenos mediante sondas de ADN.