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INGENERIA GENÉTICA APLICADA A LA PRODUCCIÓN DE PEQUEÑOS RUMIANTES 15
ha sido posible caracterizar agentes etiológicos de naturaleza
oscura (26). La utilización de este método de
diagnóstico permitiría, por ejemplo, tipificar distintas
cepas de M. paratuberculosis aisladas en ovino y caprino
(5), aunque haya resultado ineficaz en el caso
del vacuno. Sin embargo, esta técnica ha sido desbancada
en parte por la utilización de las llamadas «sondas
de ADN» y que sin duda será una herramienta indispensable
en el futuro (17) (fig. 3).
El fundamento de las sondas reside en la posibilidad
de poder separar las dos semicadenas de ADN
mediante calor o un tratamiento químico. Una vez conocida
la secuencia de nucleótidos de un fragmento
del agente patológico, es posible obtener multitud de
copias de éste recombinando el ADN en el laboratorio.
Cuando se ha obtenido en suficiente cantidad, se
separan las semicadenas y se marcan, constituyendo
la llamada «sonda». El sistema de marcado puede ser
con radiactividad, fluorescencia o agentes enzimáticos
conocidos. Cualquier semicadena de ADN tiene
una peculiaridad, y es que tiende a estabilizarse
uniéndose con una semicadena complementaria, que
podría proceder fácilmente del agente patógeno.
La metodología de diagnóstico consiste en extraer
el ADN de la muestra (sangre, visceras, etc.) y desnaturalizarlo,
es decir, dividirlo en semicadenas, no sólo
lo hará el ADN de las células, también afectará al
agente patógeno. El ADN obtenido se fija posteriormente
a unos filtros especiales de nitrocelulosa. A
continuación se añade la sonda marcada y ésta se encargará
de buscar un fragmento de ADN complementario
al que unirse. Si tras el lavado del filtro es posible
detectar sonda marcada, puede establecerse, sin
lugar a dudas, la presencia del agente patógeno.
Este método ha demostrado ser efectivo no sólo con
agentes virales en estado latente (24), también con
bacterias (23) y parásitos (25). Cuando se simplifique
la técnica, posiblemente deshancará a los métodos
serológicos tradicionales en un futuro muy próximo.
Desarrollo de vacunas recombinantes
Actualmente existen dos tipos de vacunas: las inactivadas,
relativamente seguras, y las vacunas vivas,
que pese a estimular una mejor respuesta inmunitaria
presentan el peligro de una reversión hacia una
forma virulenta que en vez de detener una epidemia
puede desencadenarla (26). Las vacunas recombinantes,
es decir, aquellas obtenidas por ingeniería genética
gozarían de las ventajas de ambas, son seguras y
muy activas. El gran inconveniente que ha limitado su
mayor desarrollo en Veterinaria es el de su alto coste.
No por la producción en sí, sino por el trabajo que representa
el aislar y conocer el código genético de un
agente patógeno.
Las investigaciones se han centrado en aquellos
agentes etiológicos contra los cuales no hay vacuna o
ésta es de una efectividad relativa. Los agentes virales
por su mayor sencillez se han convertido en el mayor
foco de atención, siendo un claro ejemplo el virus de
la fiebre añosa (2).
Hay dos posibles aproximaciones desde el punto de
vista de la ingeniería genética. La primera consiste en
determinar la secuencia que codifica las proteínas
que originan la respuesta inmune, y éstas se sintetizan
como un fragmento de ADN cualquiera, se insertan
en un plásmido bacteriano que se reproduce a
gran velocidad. De esta forma pueden obtenerse a
muy bajo precio grandes cantidades de la misma sin
correr el peligro de una «reactivación» (15). La otra
posibilidad es «inactivar» el agente patógeno, eliminando
de su secuencia los genes causantes del efecto
citopático, pero dejando los causantes de la respuesta
inmune y de la replicación (38). De esta forma sería
posible lograr una infección inocua que se transmitiría
a otros individuos. Este hecho constituye un factor
muy interesante, inoculando un determinado número
de individuos, se podría esperar una difusión de la
vacuna a la población. Con este planteamiento ya se
ha trabajado en porcino (19) y en vacuno (18) y es de
esperar que se extienda pronto a los pequeños rumiantes.
Síntesis de agentes terapéuticos
Una de las ventajas de la recombinación de ADN es
que abarata los costes de producción de agentes terapéuticos
de elevado precio. Actualmente no se ha pasado
de una fase puramente experimental, centrando
los estudios en agentes utilizados en Medicina, tales
como la insulina (11), pero posiblemente en un futuro
no muy lejano se aplicará a tratamientos animales.
Actualmente el área de mayor interés se centra en el
diseño y producción de nuevos agentes antibióticos (15).
Producción de animales transgénicos
genéticamente resistentes
Un animal transgénico es aquel que lleva en su dotación
genética un gen o grupo de genes introducidos
artificialmente. Aunque más adelante se profundizará
en la metodología de obtención, el gen insertado puede
regular cualquier tipo de función, y entre las posibilidades
más tentadoras está, sin duda, la de conseguir
líneas animales genéticamente inmunes (7).
Los estudios de Inmunología en los últimos años
atribuyen a las características del Sistema Mayor de
Histocompatibilidad (MHC) la capacidad de resistencia
que presentan algunos individuos frente a determinadas
enfermedades, mientras que otros son susceptibles
de padecerlas (29). Este sistema es un conjunto
bastante complejo de genes que cada individuo
hereda de sus progenitores, y cuyas características
exactas una vez conocidas podrán servir para seleccionar
aquellos animales con una mejor resistencia.
La complejidad de este sistema hace difícil pensar que
se podrá modificar mediante ingeniería genética en
un futuro próximo, pero en algunas especies ha sido
posible identificar un gen aislado capaz de incrementar
la resistencia frente a una enfermedad en particular
(40), o a un grupo de ellas. Posiblemente sea en