12 temel kurs - Kan Merkezleri ve Transfüzyon Derneği

Ulusal Kan Merkezleri ve Transfüzyon T›bb› Kursu XII - Temel Kurs
fiekil 3: Anti- HCV ‹çin RIBA.
Western Blot (WB): HIV pozitifli¤inin do¤rulanmas› için kullan›l›r. ELISA ile tekrarlayan reaktif saptanan bir örnek
WB ile çal›fl›ld›¤›nda HIV’e özgü proteinler olan p24, gp41 ve gp120/160 bantlar›ndan en az ikisinin pozitif olmas› durumunda
pozitif olarak de¤erlendirilir.
Moleküler Yöntemler: Nükleik asitlerin gösterilmesine yönelik bafll›ca iki yöntem vard›r:
1- Hibridizasyon: Aranan DNA’n›n kantitatif ölçümü yap›labilir
2- PCR (Polimerase Chain Reaction, Polimeraz Zincir Reaksiyonu, PZR): Test edilen örnekte aranan mikroorganizman›n
nükleik asiti ço¤alt›larak (amplifikasyon) ölçülebilir düzeylere getirilir. Bu flekilde çok az miktarda bulunan
etkene ait nükleik asit yakalanabilir.
Pencere döneminde olup, antikorlar› henüz negatif olan vakalar› saptayabilmek için bugün Nükleik Asit Amplifikasyon
Teknolojisi (NAT) ad› verilen testler üzerinde önemle durulmaktad›r (PCR da bir NAT testidir). Bu testler pahal›
ve rutin tarama testi olarak kullan›lamayacak kadar güç testlerdir. Bu nedenle tek tek ba¤›flç›lar›n taranmas› yerine
mini pool denen ve çok say›da ba¤›flç› serumunun (15-25 gibi) bir araya getirilmesi ile oluflturulan küçük havuzlar›n
taranmas› önerilmektedir. Bu yöntemlerle HIV enfeksiyonunda HIV-RNA antijenden 6, antikordan 10-12 gün önce,
HCV-RNA antikordan 40 gün önce, HBV-DNA da HBsAg’den 25 gün önce serumda saptanabilmektedir. Baz› Avrupa
ülkeleri ile ABD’de bu testlerin yerlefltirilmesine çal›fl›lmaktad›r. Bugün bu testler çeflitli kan ürünlerinin elde edildi¤i
plazma fraksinasyon tesislerinde plazma havuzlar›nda kullan›m alan› bulmufl, Temmuz 1999’dan itibaren Avrupa’da
tüm plazma havuzlar›nda HCV-RNA bak›lmas› zorunlu hale getirilmifltir.
fiekil 4: HCV RNA Test fiemas›.
- 106 -