12 temel kurs - Kan Merkezleri ve Transfüzyon Derneği

Ulusal Kan Merkezleri ve Transfüzyon T›bb› Kursu XII - Temel Kurs
fiekil 2: Direkt ve ‹ndirekt Antiglobulin Testi
Malzemeler:
1- 10x75 veya 12x75 mm’lik cam tüpler
2- Santrifüj
3- Benmari 37 °C’de
4- NaCl % 0.9’luk
5- Hangi antikor araflt›r›lacak ise ona uygun antijen tafl›yan % 2-5’lik eritrosit süspansiyonu
6- AHG reageni (Coombs serumu, polispesifik veya anti-IgG)
7- IgG kapl› antiglobulin kontrol eritrositleri (Coombs kontrol eritrositleri)
Yöntem:
1. a- Test e¤er gebe bir kad›nda (Rh negatif) anti-Rh antikorlar› araflt›rma amac› ile çal›fl›l›yorsa iki-üç damla hasta
serumundan bir tüpe konur.
b- Çapraz karfl›laflt›rma amac› ile çal›fl›l›yorsa iki-üç damla al›c› serumundan bir tüpe konur.
2- Üzerine bir damla % 2-5’lik eritrosit süspansiyonu ilave edilir. Eritrosit süspansiyonu:
a- Gebe bir kad›nda (Rh negatif) anti-Rh antikorlar› araflt›rmak amac› ile çal›fl›l›yorsa O Rh pozitif kandan,
b- Çapraz karfl›laflt›rma amac› ile çal›fl›l›yorsa verici eritrositlerinden haz›rlan›r.
3- En az 15 dakika en fazla 60 dakika (ortalama 30-60 dakika) 37 °C’lik benmaride inkübe edilir. Bazen Duffy ve
Kidd sistemine ait antikorlar için daha uzun süre inkübasyon gerekebilir.
4- ‹nkübasyon süresi bitiminde 1000xg’de bir dakika santrifüj edilir.
5- Santrifüj sonras› tüpler hemoliz yönünden kontrol edilir. Daha sonra dibe çöken eritrositler tekrar süspansiyon
haline getirilir ve aglütinasyon olup olmad›¤› de¤erlendirilir.
6- Aglütinasyon yoksa eritrositler % 0.9’luk SF ile en az dört kez y›kan›r. Böylece eritrositlere ba¤lanmam›fl antikorlar
ve serumda bulunan di¤er proteinler ortamdan uzaklaflt›r›l›r.
7- Y›kanm›fl eritrositlerin üzerine iki damla AHG reageni eklenir.
8- 1000xg’de bir dakika santrifüj edilir. Santrifüj sonras› aglütinasyon de¤erlendirilir ve sonuçlar kaydedilir
(Tablo 3).
- 91 -