12 temel kurs - Kan Merkezleri ve Transfüzyon Derneği
12 temel kurs - Kan Merkezleri ve Transfüzyon Derneği
12 temel kurs - Kan Merkezleri ve Transfüzyon Derneği
Create successful ePaper yourself
Turn your PDF publications into a flip-book with our unique Google optimized e-Paper software.
Ulusal <strong>Kan</strong> <strong>Merkezleri</strong> <strong>ve</strong> <strong>Transfüzyon</strong> T›bb› Kursu XII - Temel Kurs<br />
Hatal› Negatif DAT Sonuçlar›<br />
Hatal› negatif DAT sonuçlar›n›n ek nedenleri;<br />
1- Sadece komplemanla kaplanm›fl hücrelerde e¤er test hemen okunmazsa aglütinasyon görülmeyebilir. Ba¤l›<br />
kompleman›n en iyi tespiti için uygulay›c›lar; oda s›cakl›¤›nda 5 dakika inkübasyon <strong>ve</strong> hemen ard›ndan santrifüj<br />
<strong>ve</strong> de¤erlendirme önermektedirler. Bu tür bir inkübasyon, negatif bir DAT’› pozitif bir DAT’a dönüfltürebilir.<br />
2- Az say›da ba¤l› globulin molekülleri olan hücreler, standart DAT’lerde negatif sonuçlar <strong>ve</strong>rebilir. Polispesifik <strong>ve</strong><br />
anti-IgG antiglobulin reagenleri hücre bafl›na 200-500 IgG molekül varsa aglütinasyonu tespit edebilmektedirler.<br />
Hatal› Negatif IAT Sonuçlar›<br />
Hatal› negatif IAT sonuçlar›n›n ek nedenleri;<br />
1- Uygun koflullarda saklanmayan eritrositler <strong>ve</strong> serum reaktivite kaybeder. Afl›r› s›ca¤a maruz kalmak <strong>ve</strong>ya tekrarlanan<br />
dondurma <strong>ve</strong> erimeler antikor reaktivitesini bozar. Eritrositler, dondurma <strong>ve</strong>ya afl›r› s›ca¤a maruz kald›klar›nda<br />
hemolize u¤rarlar.<br />
2- Anti-Jk a <strong>ve</strong> Anti-Jk b gibi nadir antikorlar, sadece polispesifik AHG kullan›ld›¤›nda <strong>ve</strong> aktif kompleman mevcut<br />
oldu¤unda tespit edilebilirler. Antikoagülanlar›n ço¤u Ca + <strong>ve</strong> Mg + iyonlar›n› flelazyona u¤rat›rlar. Serum yerine<br />
plazma kullanmak, bu nadir antikorlar›n tespit edilmemesine yol açabilir. Eski serum örneklerinde <strong>ve</strong>ya uygun<br />
koflullarda saklanmam›fl serum örneklerinde de kompleman›n aktivitesi bozulaca¤›ndan, bu antikorlar tespit<br />
edilmeyebilir.<br />
Hatal› Pozitif DAT <strong>ve</strong> IAT Sonuçlar›n›n Nedenleri<br />
1- Y›kanma <strong>ve</strong> AHG serumu eklenmeden önce eritrositler aglütine olabilir. Potent so¤uk reaktif otoantikor tafl›yan<br />
örneklerde eritrositler, oda s›cakl›¤›nda <strong>ve</strong>ya bunun alt›ndaki s›caklarda aglütine olabilirler. Bu, immünolojik<br />
aç›dan aktif materyal eklenmeden önce y›kanm›fl eritrosit süspansiyonunun görüntüsünün gözlenmesiyle tespit<br />
edilmelidir.<br />
2- Kirli cam eflya içindeki partiküller <strong>ve</strong>ya kontamitantlar, eritrositlerin aglütinasyonuna neden olabilir. E¤er tüm<br />
kan örneklerine ait testlerin hepsi zay›f olarak reaktifse, yeni test tüpleri kullan›larak testin tekrarlanmas› gerekir.<br />
3- Afl›r› santrifüj, eritrositleri o kadar s›k› ba¤layabilir ki kümelenme tamamen ayr›lamayabilir <strong>ve</strong> aglütinasyonu yorumlamada<br />
hata yap›labilir.<br />
Hatal› Pozitif DAT Sonuçlar›<br />
Hatal› pozitif DAT sonuçlar›n›n ek nedenleri;<br />
1- Kompleman komponentleri, öncelikle C 4 , kan p›ht›lar›ndan <strong>ve</strong>ya 4 °C’de saklanm›fl CPDA-1’deki ba¤›flç› örneklerinden<br />
al›nan eritrositlere ba¤lanabilir. Bu do¤al olarak geliflen so¤uk reaktif, s›kl›kla insan serumunda bulunan<br />
kompleman› akti<strong>ve</strong> edici otoaglütininlerin aktivitesini gösterir. Hücrelerin komplemanla kaplanmas› invivo<br />
de¤il, saklama s›ras›nda invitro oluflmufltur. DAT’ler; EDTA, ACD <strong>ve</strong>ya CPD içeren antikoagülanl› kan örneklerinde<br />
çal›fl›lmal›d›r. Bu antikoagülanlar, eritrositlerin kompleman›n aktivasyonu ile invitro sensitize olmas›n› önler.<br />
2- Silikon jelli tüplere al›nan kan örneklerindeki eritrositlerde de benzer kompleman aktivitesi olabilir. Geisland <strong>ve</strong><br />
Milam yapt›klar› bir çal›flmada, bu tür tüplerde toplanan kan örneklerinin %13’ünün DAT’inin yanl›fl pozitif sonuçlar<br />
<strong>ve</strong>rdi¤ini buldular.<br />
3- Kompleman, dekstroz içeren solüsyonlar›n <strong>ve</strong>rildi¤i infüzyon hatlar›ndan al›nan kan örneklerindeki hücrelere<br />
ba¤lanabilir. Bu tür örneklerde en güçlü reaksiyonlar, örnek hacmi 0.5 ml’den az oldu¤unda <strong>ve</strong>ya örnekler çok<br />
kal›n i¤ne ile al›nd›¤›nda tespit edilmifltir.<br />
IAT’de Hatal› Pozitif Sonuçlar<br />
DAT pozitif eritrosit örnekleri pozitif sonuçlar <strong>ve</strong>recektir. Genellikle, IgG kapl› eritrositler antiglobulin reaktif rea-<br />
- 93 -